【摘 要】
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Objective Aim to report preparation and quality control of targeted microbubbles (MBt) via biotin-avidin bridge, specifically verification of the "biotin-avidin-biotin" sandwich structure.Methods Lipi
【机 构】
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中山大学附属第一医院,广州,510080
【出 处】
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1st International Symposium on Ultrasound Molecular Imaging
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Objective Aim to report preparation and quality control of targeted microbubbles (MBt) via biotin-avidin bridge, specifically verification of the "biotin-avidin-biotin" sandwich structure.Methods Lipid microbubbles filled with sulfur hexafluoride were produced by sonication and compared with SonoVue.MBt were produced via biotin-avidin bridge.Specifically, the "biotin-avidin-biotin" sandwich structure on the surface of MBt was verified in vitro using fluorescence.Adhesion of alpha(v) beta(3)-integrin targeted MBt (MBαvβ3) to human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) was tested using the parallel plate flow chamber (PPFC).Results Mean sizes of self-made microbubbles and SonoVue microbubbles were (2.3± 1.5) μm and (2.5± 1.4) μm with over 90% microbubbles less than 6μm and 8μm in diameter, respectively (P >0.05).As to the identification of MBt, bright green fluorescence was observed on the Mbbio incubated with fluorescein isothiocyanate labeled streptavidin (FITC-SA) and on Mbbio-SA incubated with FITC labeled biotin.There was no fluorescence seen on non-targeted control microbubbles, Mbbio incubated with FITC labeled protein A and Mbbio-SA incubated with FITC labeled protein A.The adherent rate of MBαvβ3 was significantly higher than MBt with non-specific antibody (MBc) in PPFC test, with 9.9 ± 3.1 of MBαvβ3 and 0.8 ± 0.3 of MBc adhered to HUVECs, respectively (P<0.05).Conculsion "Biotin-avidin" is a reliable method to attach molecular probe onto the surface of microbubbles.
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