【摘 要】
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本试验构建了H1亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/LM/2004(H1N1)HA基因表达质粒，基因免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠，加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。通过ELISA、H
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/ 农业部动物流感重点开放实验室，黑龙江 哈尔滨 150001；东北农业大学，黑龙江 哈尔滨 150030
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
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本试验构建了H1亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/LM/2004(H1N1)HA基因表达质粒，基因免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠，加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。通过ELISA、HI试验筛选阳性克隆。应用ELISA、HI试验和Western blot试验测定McAb的反应性和特异性。共获得3株分泌抗H1亚型猪流感病毒HA蛋白的杂交瘤细胞株，分别命名为8C4、8C6、9D6。McAb腹水ELISA效价在1:16000～1:256000之间；HI效价为1:512～1:256000；对A/Swine/Guangdong/LM/2004的中和效价分别为：10-2.83、10-6.4、10-5.8。Western blot分析结果显示，3株McAb只与H1亚型猪流感病毒HA蛋白反应。HA蛋白特异性McAb的研制为H1抗原变异分析及H1亚型猪流感诊断方法的建立奠定了物质基础。
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