【摘 要】
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[目的]克隆拟步甲科小胸鳖甲Microdera punctipennis 低温响应的几丁质酶基因,以探究昆虫几丁质酶基因的特性,为功能鉴定和应用提供参考。[方法]本研究运用RACE 技术扩增
【机 构】
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新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046
【出 处】
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新疆动物学会2016年学术研讨会暨第七届青年学术论坛
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[目的]克隆拟步甲科小胸鳖甲Microdera punctipennis 低温响应的几丁质酶基因,以探究昆虫几丁质酶基因的特性,为功能鉴定和应用提供参考。[方法]本研究运用RACE 技术扩增基因全长cDNA,根据ORF 序列PCR,并采用生物信息学进行序列分析。[结果]扩增得到目的基因的5’末端序列和3条3’末端序列,基因Mp394seq2 全长cDNA 的电子拼接序列有3 种,推定该基因ORF 为1551bp,编码516 个氨基酸,结构预测显示其属于18 家族糖苷水解酶。最终克隆得到8 个几丁质酶基因,分别命名为MpCht-1、MpCht-15、MpCht-2a、MpCht-7b 、MpCht-10c 、MpCht-A、MpCht-B 和 MpCht-E,均为稳定的酸性亲水性胞外蛋白,均具有修饰位点,根据蛋白结构域特征初步将其分为4 种,系统进化树分析表明8 个基因聚为一类,与赤拟谷盗的Tribolium castaneum 的chitinase 8 precursor 高度同源。
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