【摘 要】
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目的：自制免疫亲和层析柱,采用亲和层析法获取高纯度的抗氯霉素抗体并对其进行活性分析。方法：采用硫酸铵分级沉淀法对抗体进行初步提取。然后选用3,3′-二氨丙基亚胺(DADP
【机 构】
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华中农业大学食品科技学院,武汉430070
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目的：自制免疫亲和层析柱,采用亲和层析法获取高纯度的抗氯霉素抗体并对其进行活性分析。方法：采用硫酸铵分级沉淀法对抗体进行初步提取。然后选用3,3′-二氨丙基亚胺(DADPA)作为亲和凝胶与配基氯霉素之间的“间隔臂”,制备分离纯化抗氯霉素特异性IgG的亲和层析柱,对IgG粗品进行亲和层析纯化,并用ELISA法检测其活性。结果：经饱和硫酸铵分级沉淀,可除去大部分的杂蛋白,较好实现对目标蛋白的初步分离；采用自制的免疫亲和层析柱,可获得高纯度的兔抗氯霉素抗体,检测其活性比纯化前提高了4倍,交叉反应结果显示抗体对CAP有高的特异性,对其他类似药物无反应活性。结论：应用本试验所建立的方法可得到高纯度的抗氯霉素抗体,为氯霉素的免疫检测奠定了基础。
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