有氧运动对小鼠创面愈合及TGF-β1/Smad2通路的影响

来源 :2012年中国运动生理生化学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cctasty
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  目的:研究有氧运动锻炼和伤后运动康复对小鼠创面愈合的影响,并从TGF-β1/Smad2通路探讨有氧运动影响创面愈合的分子机制.方法:SPF级8周龄雄性昆明小鼠51只,体质量22~ 25g,于SPF级动物房中饲养,适应3天后按体重分层随机分为A(伤前锻炼及伤后运动)、B(伤后运动)、C(伤后安静)3组.A组采用转轮式疲劳仪以低难度、20rpm(转/分)、30min/次/天,6天/周,持续4周.B组以10rpm、15min/次/天,适应运动2天后,A、B、C组同时进行皮肤创伤手术.小鼠背部用10% Na2S溶液脱毛,面积约6cm×8cm,手术当天禁食,75%酒精消毒后用无菌手术剪剪取背部全层皮肤1cm×1.5cm(2个髂前上棘连线中点上2cm即为切面中心点),棉球止血后于单笼饲养.伤后第1~3天,A、B组进行低难度、10rpm、10min/次/天的运动康复,伤后第4~7天进行15rpm、30min/次/天的运动,之后进行15rpm、30min/次/天的运动.分别在伤后第3、6、9天运动后3小时末以颈椎脱臼法处死5只小鼠/组,对创面描膜拍照,用图像分析软件计算创面愈合率[(前次创面积-当次创面积)/前次创面积×100%];取创缘及创面全层组织,取5mm×5mm×2mm组织块用4%多聚甲醛液固定12小时,经过脱水、透明、透蜡、包埋、修块、切片(5um)烘干后待用,其余用液氮速冻.HE染色行病理观察,免疫组化和WB法检测TGF-β1和Smad2蛋白表达水平.结果:A组创面愈合速率最快,B组次之,C组最慢.HE染色观察可见各组伤后第3天创面以大量液体渗出及炎症细胞浸润为主,B、C组比A组明显.伤后第6天,A组组织细胞增加,提示肉芽组织修复性增生;B组少量增生,C组尚见少量炎性细胞浸润.伤后第9天,A组有大量肉芽组织增生,而B组中等量,C组少量.免疫组化和WB检测显示:伤后第3天,各组间TGF-β1及Smad2表达差异不明显.伤后第6天,各组TGF-β1表达量均有增加,A、B组增加均显著(P<0.05),同时A组TGF-β1表达量高于B组和C组(P<0.01),且B组高于C组(P<0.05);相反,各组Smad2表达量均减少,A、B组明显减少(P<0.05),而A组少于B、C组(P<0.01),B组高于C组(P<0.05).伤后第9天,各组TGF-β1表达量继续增加,A、B组极显著增加(P<0.01),A组明显高于B、C组(P<0.05或0.01),B组高于C组(P<0.01);相反,各组Smad2表达继续减少,A、B组明显减少(P<0.05),A组少于B、C组(P <0.05或0.01),B组少于C组(P<0.01).结论:创伤前及伤后的有氧运动干预能加速创面愈合过程,这可能与有氧运动增强创面TGF-β1表达及抑制受体活化性蛋白Smad2表达以激活TGF-β1/Smad2信号传导通路来增加创面肉芽组织ECM沉积等机制有关.
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