【摘 要】
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目的 研究赖氨酸羟化酶(lysyl hydroxylase)在肺纤维化中胶原沉积中的作用及相关机制.方法 1、TGF-β1刺激HLF-1细胞株1d、3d、5d,western blot检测а-SMA、COL-1蛋白的表达,寻找刺激后最有效的时间.2、据最有效的刺激时间后,(1)免疫荧光方法检测LH1、LH2、LH3的表达.(2) Western blot和RT-PCR分别检测LH1、LH2、LH3
【出 处】
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2016中华医学会呼吸病学年会暨第十七次全国呼吸病学学术会议
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目的 研究赖氨酸羟化酶(lysyl hydroxylase)在肺纤维化中胶原沉积中的作用及相关机制.方法 1、TGF-β1刺激HLF-1细胞株1d、3d、5d,western blot检测а-SMA、COL-1蛋白的表达,寻找刺激后最有效的时间.2、据最有效的刺激时间后,(1)免疫荧光方法检测LH1、LH2、LH3的表达.(2) Western blot和RT-PCR分别检测LH1、LH2、LH3蛋白及mRNA的表达,寻找最有效的LH-a.3、据第一二部分实验条件,敲低LH-a,Western blot和RT-PCR分别检测а-SMA、COL-1、MMP-9蛋白及а-SMAmRNA、COL-1、MMP-9mRNA的表达情况.结果 1、TGF-β1刺激HLF-1细胞5d后а-SMA、COL-1蛋白表达最明显.2、免疫荧光、Western blot和RT-PCR结果显示LH2表达增加最显著.3、敲低LH2后а-SMA、COL-1蛋白及а-SMAmRNA、COL-1mRNA表达下调；MMP-9蛋白及mRNA表达上调(P＜0.05).结论 赖氨酸羟化酶通过增加细胞外胶原沉积,减少其降解,促进了肺纤维的发生发展.
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