论文部分内容阅读
目的 :通过体内和体外实验观察小鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus, MCMV)早期感染对小鼠脾脏CD8~+T、γδT和NK细胞亚群和功能变化的影响,以将感染后增强免疫细胞功能的方法作为增强机体抗肿瘤免疫效应途径的理论基础。方法 :分别用5×10~4 PFU(A)、5×10~5 PFU(B)MCMV和无菌PBS(C)腹腔注射小鼠,体内感染9天;用1×10~4 PFU(D)、1×10~5 PFU(E)和1×10~6 PFU(F)MCMV感染离体小鼠脾脏淋巴细胞24 h和48 h,同时设置空白对照组(G)。多色流式细胞术检测检测脾脏淋巴细胞表型和功能,ELISA检测体内感染组IFN-γ、IL-2和颗粒酶B的水平。结果 :与C组比较,MCMV体内感染小鼠后,MCMV特异性CTL,B组CD8~+T细胞分泌的IFN-γ、IL-2和表达的颗粒酶B,A、B组γδT细胞表达的颗粒酶B、CD107a,B组NK细胞表达的CD107a水平均增加;A、B组未成熟NK细胞数减少,但成熟1阶段NK细胞明显增加;以上指标在A、B组间均无差异。ELISA结果提示A、B组IFN-γ、IL-2和颗粒酶B水平均较C组升高,且随病毒滴度增加而升高。与G组相比,体外感染24 h和48 h后D、E、F组CD8~+T细胞表达的CD69, 24 h后CD4~+T细胞表达的CD69, 24 h后F组CD8~+T细胞分泌的IFN-γ,24 h和48 h后各感染组CD8~+T细胞分泌的TNF-α以及24h后D、E组CD4~+T细胞分泌的TNF-α均增加,CD8~+T细胞和CD4~+T细胞各组间IL-2分泌和颗粒酶表达未见明显差异;与G相比,体外感染24h和48h后各感染组均可见NK细胞IL-2和颗粒酶B水平升高;以上表面分子、细胞因子和颗粒酶B的表达水平普遍随着病毒滴度的增加而升高。结论:MCMV早期感染后CD8~+T、γδT和NK细胞功能可能较前增强,这将为抗肿瘤免疫治疗提供理论基础。