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目的：近年来，随着拉米夫定的广泛应用，部分患者出现HBV多聚酶基因变异，主要是酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸(YMDD)变异，而产生耐药性，最常见的有YVDD(M552V)和YIDD(M552I)变异。近几年国内外研究都关注于服用拉米夫定后的患者YMDD变异，但有一部分乙肝病毒存在自然YMDD变异，在国内目前尚缺乏大样本的YMDD自然变异的研究。本文对未经治疗的449例慢性乙型肝炎患者进行YMDD变异株的检测，探讨不同慢性乙型肝炎患者血清中乙肝病毒YMDD的自然突变及与血清HBV-DNA水平的关系。
方法：选取2007年10月至2009年12月在华中科技大学同济医学院附属协和医院门诊未经任何药物治疗的HBV感染患者449例。其中男327例，女122例，男∶女为2.68∶1。年龄10～83岁，中位年龄32岁。主要仪器为瑞士Roche公司生产的LightCycler实时荧光定量PCR检测仪；试剂为深圳市匹基生物工程股份有限公司提供的乙型肝炎病毒核酸扩增(PCR)荧光定量测定及YMDD变异检测试剂盒。利用HBV特异引物及特异Taqman MGB探针，并结合FQ-PCR技术，同时检测HBV载量以及YMDD变异情况。应用SPSS软件进行数据分析，计数资料采用百分率表示，计量资料各组间比较采用x2检验，p＜0.05认为有统计学差异。
结果：对449例未治疗的HBV感染患者的检测结果表明，共有46例发生变异，自然变异率为10.24％；其中YVDD变异株16例(3.56％)；YIDD变异23例(5.12％)；YMDD／YVDD变异3例(0.67％)；YMDD／YIDD变异4例(0.89％)。YMDD变异与患者年龄及性别没有统计学差异(p＞0.1)，对不同含量DNA的分析，在DNA病毒载量低的患者中，YMDD突变率较高(x2=15.42，p＜0.01)。其中YVDD的突变率在HBV DNA 103～4拷贝／ml中明显高于在105拷贝／ml以上感染患者。根据患者血清标志物类型不同将病人分为三组：乙型肝炎病毒E抗原(HBeAg)阳性和乙型肝炎病毒E抗体(HBeAb)阴性；HBeAg阴性及HBeAb阳性；HBeAg和HbeAb均为阴性。病人YMDD自然变异检出率三组之间均无显著性差异(x2=3.62，P＞0.05)。
结论：部分YMDD野生株存在自然变异。本组乙肝患者YMDD自然变异率与年龄，性别及乙肝血清标志物无关。变异株的病毒复制能力低于未变异的野生株，YVDD变异株的复制能力低于YIDD变异株。
方法：选取2007年10月至2009年12月在华中科技大学同济医学院附属协和医院门诊未经任何药物治疗的HBV感染患者449例。其中男327例，女122例，男∶女为2.68∶1。年龄10～83岁，中位年龄32岁。主要仪器为瑞士Roche公司生产的LightCycler实时荧光定量PCR检测仪；试剂为深圳市匹基生物工程股份有限公司提供的乙型肝炎病毒核酸扩增(PCR)荧光定量测定及YMDD变异检测试剂盒。利用HBV特异引物及特异Taqman MGB探针，并结合FQ-PCR技术，同时检测HBV载量以及YMDD变异情况。应用SPSS软件进行数据分析，计数资料采用百分率表示，计量资料各组间比较采用x2检验，p＜0.05认为有统计学差异。
结果：对449例未治疗的HBV感染患者的检测结果表明，共有46例发生变异，自然变异率为10.24％；其中YVDD变异株16例(3.56％)；YIDD变异23例(5.12％)；YMDD／YVDD变异3例(0.67％)；YMDD／YIDD变异4例(0.89％)。YMDD变异与患者年龄及性别没有统计学差异(p＞0.1)，对不同含量DNA的分析，在DNA病毒载量低的患者中，YMDD突变率较高(x2=15.42，p＜0.01)。其中YVDD的突变率在HBV DNA 103～4拷贝／ml中明显高于在105拷贝／ml以上感染患者。根据患者血清标志物类型不同将病人分为三组：乙型肝炎病毒E抗原(HBeAg)阳性和乙型肝炎病毒E抗体(HBeAb)阴性；HBeAg阴性及HBeAb阳性；HBeAg和HbeAb均为阴性。病人YMDD自然变异检出率三组之间均无显著性差异(x2=3.62，P＞0.05)。
结论：部分YMDD野生株存在自然变异。本组乙肝患者YMDD自然变异率与年龄，性别及乙肝血清标志物无关。变异株的病毒复制能力低于未变异的野生株，YVDD变异株的复制能力低于YIDD变异株。