【摘 要】
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背景与目的：EML4-ALK,为近年来新发现的融合基因,具有这类基因的患者对TKI类药物不敏感,可能是肺癌TKI耐药相关的新分子靶点.EML4-ALK在肺癌发生发展中的作用机理尚不清楚.因此研究EML4-ALK融合基因在肺癌中的生物学功能,探讨其与EGFR-TKIs的相互作用机理,必将为深化肺癌的分子靶向治疗奠定基础.方法：利用分子克隆技术构建EML4-ALK融合基因的V1亚型和V3亚型的真核细胞
【出 处】
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中国抗癌学会肺癌专业委员会第十二届全国肺癌学术大会
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背景与目的：EML4-ALK,为近年来新发现的融合基因,具有这类基因的患者对TKI类药物不敏感,可能是肺癌TKI耐药相关的新分子靶点.EML4-ALK在肺癌发生发展中的作用机理尚不清楚.因此研究EML4-ALK融合基因在肺癌中的生物学功能,探讨其与EGFR-TKIs的相互作用机理,必将为深化肺癌的分子靶向治疗奠定基础.
方法：利用分子克隆技术构建EML4-ALK融合基因的V1亚型和V3亚型的真核细胞表达载体,通过脂质体瞬时转染技术初步探讨其对肺癌吉非替尼高度敏感细胞株PC-9(EGFR 19外显子del-E746-A750突变)生物学行为的影响及耐药性的改变情况;同时,建立稳定转染EML4-ALK-V1或EML4-ALK-V3亚型表达载体的肺癌细胞株.
结果：应用分子克隆技术成功构建了pcDNA3.1-EML4-ALK-V3真核表达质粒,并经酶切和DNA测序得到确认;建立了稳定转染的PC-9-pcDNA3.1-EML4-ALK-V3细胞株;在稳定转染pcDNA3.1-EML4-ALK-V3和pcDNA3.1表达质粒的细胞株中,经不同浓度梯度(0-32μg/ml)吉非替尼处理后,应用MTT检测分析发现,转染了EML4-ALK基因的PC-9细胞的抑制率明显低于对照组细胞的抑制率.
结论：pcDNA3.1-EML4-ALK转染后可增加人肺癌细胞株PC-9对吉非替尼的耐药性,提示EML4-ALK可能与EGFR-TKIs的耐药性有关.
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