【摘 要】
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目的：探讨人羊膜(HAM)联合重组人表皮生长因子凝胶(rhEGF)治疗皮肤Ⅲ度烧伤的疗效与作用机制.方法：铜棒烫伤制备兔皮肤Ⅲ度烧伤,切痂后创面贴敷HAM、HAM+rhEG、rhEGF,观测烧伤创面愈合率、痊愈时间,创面组织病理学检查,免疫组化染色与图像分析微小血管密度,双色免疫荧光染色观察人源细胞定植,Masson染色与图像分析检测皮肤组织纤维化程度,ELISA法检测创面组织细胞因子含量.结果：
【机 构】
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遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室 贵州遵义563003 遵义医学院附属医院烧伤整形外科
【出 处】
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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会
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目的：探讨人羊膜(HAM)联合重组人表皮生长因子凝胶(rhEGF)治疗皮肤Ⅲ度烧伤的疗效与作用机制.方法：铜棒烫伤制备兔皮肤Ⅲ度烧伤,切痂后创面贴敷HAM、HAM+rhEG、rhEGF,观测烧伤创面愈合率、痊愈时间,创面组织病理学检查,免疫组化染色与图像分析微小血管密度,双色免疫荧光染色观察人源细胞定植,Masson染色与图像分析检测皮肤组织纤维化程度,ELISA法检测创面组织细胞因子含量.结果：①切痂术后第3d、8d、18d,HAM组烧伤创面愈合率分别为(35.78±6.75)％、(71.21±6.63)％和(96.65±1.42)％,与HAM+rhEG组愈合率相当,两组均高于rhEGF组,3组不同处理的创面愈合率都高于对照组.HAM、HAM+rhEG组创面分别于18.40±1.26d和18.00±1.83d达痊愈,rhEGF组20.20±1.69d痊愈,3组痊愈时间均显著低于对照组22.13±1.25d.②HAM、HAM+rhEG组创面炎症反应明显较模型组、rhEGF组轻,并较早出现细胞增殖与创面修复,再生皮肤组织结构完整、附属器官丰富清晰,两组真皮层纤维化比率分别为(8.80±1.65)％和(8.50±1.70)％,低于正常组、对照组和rhEGF组；而皮下组织层纤维化比例为(16.48±1.86)％和(16.02±2.56)％,高于正常组,但明显低于对照组及rhEGF组.③第8d,HAM、HAM+rhEG组创面组织中,未检测到表达Cy3标记的人细胞核特异性抗原阳性的红色荧光细胞.且两组新生组织微细血管数显著高于对照组和rhEGF组,rhEGF组与对照组微细血管密度无明显差异.④第3d,HAM、HAM+rhEG、rhEGF组创面组织SDF-1表达量分别为192.63±17.39 ng/L, 157.76±8.69 ng/L and 199.21±27.77 ng/L,显著高于对照组和正常组,前两组又显著高于rhEGF组；并于第8、18d趋于正常皮肤组织水平.⑤第8d,HAM、HAM+rhEG、rhEGF组新生组织TGF-β含量分别为3441.50±125.27、3071.25±221.04和3504.00±134.41ng/L,显著高于对照组2912.50±181.68,HAM、HAM+rhEG组TGF-β含量又高于rhEGF组.⑥第8d,HAM、HAM+rhEG组创面组织EGF含量明显高于rhEGF组和对照组；第18d,HAM、HAM+rhEG组和rhEGF组新生组织EGF含量则显著低于对照组.⑦第8、18d,HAM、HAM+rhEG组和rhEGF组新生组织bFGF含量高于正常皮肤,但3组间比较无明显差异(P＞0.05).结论：HAM及其联合rhEGF治疗皮肤Ⅲ度烧伤,明显提高烧伤创面愈合率,缩短痊愈时间,改善创面组织病理学变化,作用机制涉及减轻创面炎症反应,促进新生血管形成,提高创面和新生组织SDF-1、TGF-β和EGF水平,羊膜治疗Ⅲ度烧伤的疗效及其提高创面修复质量优于传统的凡纱覆盖包扎与rhEGF凝胶治疗.
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