【摘 要】
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以油脂诱导的Pseudomonas stutzeri发酵液为粗酶液，经SP-sepharose FF一步纯化得到电泳纯的脂肪酶。基于该脂肪酶蛋白的LC/MS/MS分析结果，设计引物扩增了该脂肪酶的基因参
【出 处】
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纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会
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以油脂诱导的Pseudomonas stutzeri发酵液为粗酶液，经SP-sepharose FF一步纯化得到电泳纯的脂肪酶。基于该脂肪酶蛋白的LC/MS/MS分析结果，设计引物扩增了该脂肪酶的基因参照报道的LipA的折叠酶(LipB)序列，克隆了该菌的折叠酶基因，ORF长度为1014bp，与LipB的基因同源性为79.1％，共编码338个氨基酸，氨基酸同源性为81％。将该脂肪酶与折叠酶共同连接到pET22b(+)，转入E.coli BL21进行表达。IPTG低温诱导后产生较多的包涵体破碎上清酶活仅为0.73U/mL。
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