HBsAg和抗-HBs双阳性无症状乙肝携带者HBV S基因序列分析

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目的研究HBsAg和抗-HBs双阳性无症状乙肝携带者("双阳性")HBV S基因"a"决定簇基因变异情况。方法利用乙肝酶免试剂初筛后用Abbott试剂确认出"双阳性"血清20份,荧光PCR试剂检测HBV DNA,采用PCR方法扩增S区或"a"决定簇基因序列,将PCR产物克隆入T载体,选择4-10个阳性克隆测序,分析"a"决定簇基因变异情况,同时利用INNO-LiPA HBV genotyping试剂对其进行基因分型检测;另外随机选择HBsAg阳性、抗-HBs阴性血清72份,采用PCR测序方法检测S基因序列。基因序列利用DNAstar软件构建进化树划分基因型并进行氨基酸变异分析。比较"双阳性"的样品和HBsAg阳性抗-HBs阴性样品间的差别。1m和6m两次随访检测双阳性样品的HBsAg抗-HBs。结果 "双阳性"样品中核酸阳性比例为16/20;"a"决定簇基因突变比例为6/16,变异类型有T123N,I123S,I126S,A128D,M133T,F134L,F134S和C149R。72份对照血清中变异比例为6/72,变异类型有T123A,I126N,I126S,T131N,M133T,F134I,F134Y,T143M和G145R。"双阳性"样品与对照组的血清型(X~2=2.43,P>0.05)和B、C基因型(X~2=2.43,P>0.05)分布差别均无显著的统计学意义。2例抗-HBs和2例HBsAg在6m阴转,其余16例随访期末仍为"双阳性"。结论本研究未发现"双阳性"与HBV"a"决定簇变异、血清型、基因型有关,但"双阳性"中的核酸阳性率较高,对"双阳性"的原因应进一步深入研究。
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