【摘 要】
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根据人参对皮肤有增强血液循环、改善皮肤营养环境等美容功效和KGF-2促进上皮细胞损伤修复的作用,本实验选用人参发状根作为生物反应器生产KGF-2蛋白,以期利用人参的抗衰老和抗氧化功能与KGF-2蛋白的促进上皮细胞损伤修复等特点改善皮肤环境,起到祛疤美容的功效,开发传统中药材人参与角质细胞生长因子结合的美容产品.为了提高外源基因在植物中的表达量,本实验将人源KGF-2基因进行了植物偏好密码子的改造,
【机 构】
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吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心;吉林农业大学生命科学学院,长春市130118
【出 处】
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泛环渤海地区(七省二市)生物化学与分子生物学会2010年学术交流会
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根据人参对皮肤有增强血液循环、改善皮肤营养环境等美容功效和KGF-2促进上皮细胞损伤修复的作用,本实验选用人参发状根作为生物反应器生产KGF-2蛋白,以期利用人参的抗衰老和抗氧化功能与KGF-2蛋白的促进上皮细胞损伤修复等特点改善皮肤环境,起到祛疤美容的功效,开发传统中药材人参与角质细胞生长因子结合的美容产品.为了提高外源基因在植物中的表达量,本实验将人源KGF-2基因进行了植物偏好密码子的改造,利用实验室改造好的p1390作为载体骨架,通过DNA重组技术,成功构建植物双元表达载体重组质粒p1390-35s-KGF-2,将该重组质粒通过冻融法转入发根农杆菌A4感受态细胞中,得到含有KGF-2质粒的发根农杆菌重组菌株A4-KGF-2；通过实验优化出人参发根的最佳诱导条件和遗传转化的最佳方法：用OD600=0.586的A4-KGF-2菌液侵染2-3年生人参根,将制备好的菌液滴加在切片的根盘上,在无激素添加的MS基本培养基上共培养5-6周,再转移至MS+Cef(500mg/L)培养基上进行抑菌培养,最终得到了转KGF-2基因的人参发状根,并将得到的转基因发状根以0.1g/mL接种量接种于MS液体培养基中进行扩繁培养.
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