环介导等温扩增技术快速检测肉中沙门氏菌的研究

来源 :2011食品安全技术与标准国际研讨会暨AOAC中国区年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenlijuan1986
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  本研究针对NCBI公布的沙门氏菌特异invA基因序列(GenBankEU348367)中的保守序列,使用在线软件设计LAMP引物。建立的25μLAMP反应体系为外引物(F3和B3)各0.2μM,内引物(FIP和BIP)各0.8μM,环引物(LF和LB)各0.4μM,2.0mmol/LMg2+,1.6mmol/L dNTP,2.5μLBst DNA Polymerase Buffer 8U Bst DNA polymerase,1.6 MBetaine,1μ模板DNA,灭菌双蒸水补足体系到25μl。扩增反应条件:62℃水浴30min,再在80℃水浴锅中10min使酶灭活。扩增结束后,将产物在1.5%琼脂糖凝胶中进行电泳判断检测结果。对12株常见致病菌分别进行LAMP反应来验证引物的特异性,结果表明:沙门氏菌为阳性结果,其它菌株均为阴性结果。对LAMP法快速检测沙门氏菌进行了研究,确定了检测纯菌的灵敏度,人工污染检出限,特异性,并与普通PCR检测方法进行了对比。结果表明:LAMP检测沙门氏菌纯菌的灵敏度为7.8 CFU/ml,人工污染沙门氏菌的肉中检出限为5.2×102 CFU/g。采用试剂盒提取DNA,从样品处理到报告结果,耗时2h。而对照PCR法检测沙门氏菌纯菌的灵敏度为7.8×102 CFU/ml,人工污染沙门氏菌的检出限为5.2×104 CFU/g。采用同样方法提取DNA,从样品处理到报告结果,耗时4h。
其他文献
Apple polyphenols have many protective properties including antioxidant, antimicrobial, anticancer, antiaging, antitumor, and so on. Antitumor effect of apple p
会议
秃鹫并非群居动物,它了解草原上那些大型哺乳动物在平原或草地上休息时通常聚集在一起的规律,会特别注意孤零零躺在地上的动物,所以整个觅食的过程都是单独进行.在西藏经常看
  目的 选择更加适合志贺氏菌检测的固体选择性培养基。方法 本文应用3种培养基对实验菌株和实际样品进行分离比对分析,以寻找出实用高效的分离培养基用于本菌检测。结果 从
  为建立进出口动物源性食品中志贺氏菌检验方法,本研究从检测条件入手,通过增菌方式、分离培养基特异性和生化鉴定优化方法,以不同种类食品检测和不同实验室检测验证本方法。
  本文研究了免疫磁珠法用于出口脱水蒜制品中沙门氏菌的检测,首次将免疫磁珠使用于400mL大体积溶液中,并使用高速离心代替磁棒进行分离。致病微生物捕获、分离实验结果表明
  目的 选择更为适合β-溶血性链球菌的分离培养基及培养条件。方法 本文应用2种不同的分离培养基及分离环境对实验菌株和实际样品进行分离比对,以寻求出实用高效的分离培养
九月二十三日,青海省玉树州称多县臻秦草原,牧民们从“夏窝子”往“冬窝子”转移的真实场面.
研制食品加工的方增瑞先生,退休后用废弃物研制乐器。他力倡生态文明并成效显著,新华社、中央电视台都先后给予报道,还受到公众的热情赞赏。    变废为宝制乐器    方增瑞毕业于杭州大学中文系,爱好广泛,多才多艺。“文革”中毕业回乡务工,几十年研制食品罐头。或许是心中积淀了的中华传统文化,从甲骨文至诗词礼乐,挥之不去,退休后才重温夙愿。  走进方增瑞的客厅,浓郁的文化气息扑面而来。四壁张挂着他手书诗词
  应用SN/T 1022-2010(进出口食品中霍乱弧菌检验方法)、16SrDNA鉴定法和霍乱毒素基因PCR检测法同时鉴定一株在科玛嘉弧菌平板上显示的可疑霍乱弧菌菌株,SN/T 1022-2010法和
  目的 建立食品中小肠结肠炎耶尔森菌环介导等温扩增(LAMP)检测方法。方法 本文对小肠结肠炎耶尔森菌16S-23S rDNA间区(ITS)序列进行了克隆测序,在比较小肠结肠炎耶尔森菌
会议