禾谷孢囊线虫纤维素结合蛋白新基因(Ha-cbp-1)的克隆和序列分析

来源 :第十届全国植物线虫学学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaodong0814
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  禾谷孢囊线虫(Heterodera avenae),是一个固定内寄生线虫,在中国是小麦上的重要病原.至今已从其他植物线虫中克隆出了许多致病基因,并且用于培育植物抗性品种,这些线虫包括孢囊线虫和根结线虫,而有很少的致病基因从禾谷孢囊线虫中克隆出来,更没有有效的基因用于防治禾谷孢囊线虫.本文研究的重点是防治禾谷孢囊线虫,其中包括研究其完成寄生循环的寄生基因.出于这个目的,我们用同源克隆的方法,从禾谷孢囊线虫寄生前二龄幼虫中克隆得到纤维素结合蛋白(CBP)基因Ha-cbp-1 cDNA序列.Ha-cbp-1基因cDNA包含一个开放阅读框,编码131个氨基酸残基,包括一个信号肽和一个纤维素结合区域(CBD).Ha-cbp-1的基因组DNA序列含有两个内含子.预测的禾谷孢囊线虫纤维素结合蛋白(HA-CBP-1)序列与大豆孢囊线虫纤维素结合蛋白(HG-CBP-1)序列有60%的同一性和76%的相似性,与甜菜孢囊线虫纤维素结合蛋白(HS-CBP-1)序列有60%的同一性和75%的相似性.
其他文献
本文研究了在砂土、黏性土、壤土情况下的土壤线虫情况.在沙土、黏性土、壤土中,根结线虫分别占分离出线虫总数的35.4%、29.1%、32.6%,绕线属线虫为16.2%、21.5%、26.3%;黏性土中小杆属线虫为11.7%,螺旋属线虫为10.9%.它们是该土壤线虫的优势属,稀有属是滑刃属、扭钩属、中矛线属、矛线属占、长尾属.还对土壤线虫的营养类型进行了调查与分析.
2007~2010年,在甘肃省不同地区的小麦、大麦和燕麦种植区,小麦(燕麦)抽穗至扬花期间,采集褪绿发黄、植株矮小的小麦根系及根围5~15cm深的耕作层土壤,或采集当年种植小麦、大麦和燕麦的田间土壤,用塑料袋装好保湿,运回室内冷藏备用.详细记录采集地的小麦品种、前茬作物、土壤质地以及灌溉情况等.用简易漂浮法收集孢囊,计数.共调查了甘肃省10个地市的29个麦类种植区县,采集到233份根际土壤和根系。
通过蔬菜根结线虫检测能力验证计划的实施,对包括澳门特别行政区在内的全国23个省、自治区、直辖市51个参试实验室的检测结果进行了系统评价和分析,旨在了解国内蔬菜根结线虫鉴定领域的整体水平,识别和掌握实验室间存在的差异,加强重点领域实验室能力建设,督促其保持和提高植物线虫检测能力.
2006年10月至2008年9月,笔者对深圳观赏植物线虫进行了采样调查,依据形态特征从所采集的观赏植物根际介质样品中分离鉴定出燕麦真滑刃线虫(Aphelenchus avenae Bastian,1865)、伞菌滑刃线虫(Aphelenchoides agarici Seth&Sharanma,1986)、锡博尔滑刃线虫(Aphelenchoides cibolensis Riffle,1970)
2008-2009年,作者对云南部分烟草产区和部分蔬菜产区的根结线虫病进行了调查、采样和病原线虫的种类鉴定,从而明确了受害地区根结线虫的种类及分布,为防治根结线虫病提供了理论依据。对采自云南省部分作物上的53个根结线虫病样本,运用形态学、同工酶和分子生物学方法进行鉴定,共鉴定出3种根结线虫:南方根结线虫(Meloidogyne incognita)、爪哇根结线虫(M.javanica)和花生根结线
柑橘是广西重要的经济作物,近年来种植面积逐渐扩大,线虫是柑橘侵染性病害的重要病原之一,作者于2009年分别在广西崇左市的八盆乡、扶绥县东门镇、那甘乡、宁明县华侨农场,桂林市的良丰农场、阳朔县白沙镇、平乐县源头农场、南宁市武鸣县下禄村、恭城县等地柑橘园进行了根部线虫病害调查和样品采集,共采集了根和土壤样品各91份,分离鉴定结果发现:危害广西柑橘的线虫主要有根结线虫、半穿刺线虫、矮化线虫、短体线虫、螺
变性高效液相色谱(Denaturing High Performance Liquid Chromatography,DHPLC)是近年发展起来的一种高通量筛选核酸多态性和基因突变的新技术,已广泛应用于生命科学研究的众多领域.本文对该技术的基本原理及在植物病原线虫检疫中的应用前景进行了评述.与传统的分子生物学方法相比较,DHPLC具有许多优势:高通量检测,适合大量样本的同时检测,自动化程度高,提高
大豆孢囊线虫病是大豆生产上的主要病害之一,其病原是大豆孢囊线虫(Heterodera glycine),在我国东北和黄淮海两个重要大豆产区的14个省市均有分布,严重影响大豆的产量。大豆孢囊线虫受害地块一般减产10% ~ 30%,严重地块减产70%以上。随着大豆种植面积的增加和重迎茬面积的扩大,大豆孢囊线虫发生面积增加、灾害逐年加重的趋势。因此,建立大豆孢囊线虫安全、高效防治技术体系是提高大豆产量、
RNA干涉技术在植物寄生线虫基因功能研究中得到了广泛应用.siRNA与dsRNA引起的RNAi实验周期长、成本高而不能对植物寄生线虫进行高通量的基因功能分析.esiRNA克服了上述不足,使其成为可能.本文主要阐述了esiRNA文库的构建方法、优点及esiRNA在植物寄生线虫基因功能研究中的应用前景.RNAi技术已成为植物寄生线虫基因功能研究的有效手段,植物寄生线虫基因组测序项目的不断完成及其EST
大豆孢囊线虫(Heterodera glycines,SCN)在世界各地广泛分布,是危害大豆生产的一种重要病害.本文采用特异性引物双倍PCR技术对甘肃SCN群体进行了鉴定,利用PCR技术对这些群体的核糖体基因(ribosomal DNA,rDNA)中的内转录间隔区(Internal Transcribed Spacers,ITS)进行扩增,获得的片段长度约为1030 bp.利用UPGMA方法分析了