【摘 要】
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糖蛋白卵转铁蛋白和卵黏蛋白既是鸡蛋中的营养成分和抗菌活性成分,也是公认的食物过敏原,其糖链被认为是引起人体过敏反应的抗原决定簇,分析其糖链结构,对于这两种糖蛋白
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糖蛋白卵转铁蛋白和卵黏蛋白既是鸡蛋中的营养成分和抗菌活性成分,也是公认的食物过敏原,其糖链被认为是引起人体过敏反应的抗原决定簇,分析其糖链结构,对于这两种糖蛋白的生物活性研究和开发应用以及对鸡蛋过敏的诊断和防治都有重要指导意义。本研究采用乙醇分级沉淀法和改进的两步等电点沉淀法从家鸡卵清中分别提纯卵转铁蛋白和卵黏蛋白,以PNGase F释放其N-糖链,以本实验室最近发展的非还原性释放O-糖链并同时进行l-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)标记的新方法释放其O-糖链,最后借助ESI-MS、LC-MS及MS/MS等分析手段对纯化后的O-糖链和N-糖链进行了定性定量分析。结果表明,鸡卵转铁蛋白共有16种不同序列结构的N-糖链,包括1种核心五糖结构、12种复杂型和3种杂合型,无O-糖链,并且所有N-糖链均为中性糖,无岩藻糖基化或唾液酸化的糖链;鸡卵黏蛋白共有14种O-糖链和27种N-糖链,O-糖链中5种为中性糖,9种为酸性糖,其中3种被唾液酸化修饰,3种被硫酸化修饰,其它3种同时被唾液酸化和硫酸化,而N-糖链中22种为中性糖,5种为酸性糖,其中2种被唾液酸化,2种被硫酸化,1种同时被唾液酸化和硫酸化。这些结果揭示了鸡卵转铁蛋白和鸡卵黏蛋白的糖链结构特征,既为进一步探索这两种糖蛋白糖基化与其抗原特性之间的相互关系奠定了基础,也为深入认识这两种糖蛋白的多种生物活性及其作用机理提供了参考依据。
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