【摘 要】
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目的：建立一种快速、灵敏、特异的检测猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。方法：根据JEV E基因序列的保守区6个位点设计了4条特异性LAMP引物,以JEV阳性样品RNA为模板进行一步法扩增,并对反应条件和反应体系进行了优化。结果：该方法具有较高的灵敏度,其检测极限为0.5pg;特异性实验证明其具有较高的特异性,对其他病毒性病原体均无扩增反应。与RT-Nes
【机 构】
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广西大学动物科学技术学院,南宁,530005 广西兽医研究所,南宁,530001
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会
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目的：建立一种快速、灵敏、特异的检测猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。方法：根据JEV E基因序列的保守区6个位点设计了4条特异性LAMP引物,以JEV阳性样品RNA为模板进行一步法扩增,并对反应条件和反应体系进行了优化。结果：该方法具有较高的灵敏度,其检测极限为0.5pg;特异性实验证明其具有较高的特异性,对其他病毒性病原体均无扩增反应。与RT-Nested-PCR比较,两种方法检出率的符合率为90.9％。而且反应结束后可以通过添加化学发光剂进行可视化观察,大大缩短了检测时间。该方法无需特殊仪器,只需在水浴锅中进行,是一种适于基层的简便、灵敏、快速的猪JE的检测方法。结论：成功建立了猪流行性乙型脑炎RT-LAMP方法,并在临床上进行了初步的应用。
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