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目的:研究雷公藤内酯醇(Triptolide TP)和雷公藤内酯醇聚合物胶束(Triptolide loaded polymeric micelles TP-PM)对人结肠癌HT29细胞增殖及凋亡的作用及机制,评价聚合物胶束作为雷公藤内酯醇纳米载体的可行性。
方法:用含不同浓度TP和TP-PM(1-100ng/ml)的培养液孵育HT29细胞24h、48h和72h后,利用WST-1、BrdU试剂盒测定细胞的存活率、增殖率;通过测定LDH活性判断细胞膜完整性;利用流式细胞仪测定细胞死亡、存活和凋亡率;并通过Caspase-Glo.3/7定量试剂盒测定细胞caspase 3/7的表达情况。
结果:TP和TP-PM对HT29细胞活性和细胞增殖的抑制作用显著,呈明显的剂量、时间依赖,TP-PM对HT29的抑制作用优于TP(P<0.05)。TP和TP-PM对HT29细胞膜的破坏轻微。FDA-PI双染结果显示两组中FDA阳性细胞均呈现时间、剂量依赖的下降(P<0.01);PI阳性细胞率呈现时间、剂量依赖的上升(P<0.01);FDA、PI双阴性细胞也明显上升,但不呈时间、剂量依赖关系。Caspase测定结果显示TP和TP-PM均可引起Caspase3/7活性增高,TP-PM组引起的凋亡作用强于TP组(P<0.05)。
结论:TP和TP-PM可以通过诱导凋亡的方式抑制肿瘤细胞生长和增殖,凋亡过程中Caspase-3/7活性增高;且TP-PM的作用强于TP,聚合物胶束是一种极具前景的载药体系。