论文部分内容阅读
目的：比较过敏孕妇与正常孕妇脐血单核细胞来源树突状细胞(Dendritic cells,Dc)分泌细胞因子水平的差异,了解过敏状态时树突状细胞功能特点.方法：脐血来自重庆医科大学附属第一医院出生的正常足月新生儿,出生体重为2500-4000g,出生时无窒息史,无胎膜早破及宫内感染史.孕妇纳入标准为无异位妊娠史及血制品、免疫制品使用史,将没有过敏史孕妇列为正常孕妇组,共15 例；有过敏性疾病史(包括过敏性鼻炎、哮喘、湿疹等)孕妇列为过敏孕妇组,共20例.分别取正常和过敏孕妇胎盘端脐 血 20ml,用0.01M PBS以1∶1比例稀释后加到Ficoll淋巴细胞分离液上,离心获得单个核细胞(PBMC)；加入PBS,离心、洗涤、重悬细胞,以3×106个细胞/ml 浓度加到6孔培养板中,每孔2ml,放置37℃C,5％CO2孵箱内孵育3小时；吸弃上清,用PH7.2的RPMI1640培养基轻洗,除去非黏附细胞,获得单核细胞；将过敏孕妇单核细胞分为两组,分别为过敏孕妇1组和2组,正常孕妇为正常孕妇组.分别在过敏孕妇1组和正常孕妇组单核细胞培养中加入rhGM-CSF 1000U/ml、 rhIL-4 500U/ml进行诱导,隔日半量换液并加细胞因子；培养第7天在加入rhGM-CSF、 rhIL-4的同时添加1μg/ml LPS诱导树突状细胞成熟,过敏孕妇2组只加入rhGM-CSF、 rhIL-4.收集第9天DCs培养上清,分别测定三组培养上清中的IL-12p70和IL-10水平.结果：(1)过敏孕妇脐血单核细胞来源树突状细胞在LPS作用下分泌IL-12p70和IL-10的量明显低于正常孕妇组,差别有统计学意义(P ＜0.05). (2)在L PS作用下 过敏孕妇脐血单核细胞来源树突状细胞分泌IL-12p70和IL-10的量明显高于没有LPS作用的过敏孕妇组.结论：过敏孕妇比正常孕妇DCs分泌1L-10和IL-12的量减少,说明过敏状态下DC功能与正常不同,可能存在缺陷LPS可以诱导DCs成熟,过敏孕妇DCs在LPS诱导下分泌IL-12 p70和IL-10的量增高,尤其是IL-12p70的量明显高于没有被LPS诱导的DCs,说明DCs功能的缺陷可能是导致过敏家庭史阳性婴儿易患过敏性疾病的机制之一.孕期干预可能使Th1/Th2平衡发生改变.