抗狂犬病免疫核糖核酸的分离纯化及部分理化性质和生物学活性研究

来源 :第七届全国生化与生物技术药物学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zaodt
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目的:探索一种抗狂犬病免疫核糖核酸的制备方法,为狂犬病毒暴露后的免疫治疗开辟途径。方法:用狂犬病毒免疫马,从抗体阳性血清的马匹中分离肝脏,依次采用十二烷基磺酸钠、苯酚、三氟甲烷、乙二醇单甲醚、十六烷基三甲基溴化铵、乙醇等提取总RNA。结果:提纯品经理化性质检测,得到的iRNA占肝脏总重的0.15%。其中DNA含量2.86%,蛋白质含量1.16%。最大吸收峰位于258nm;258nm与280nm比值2.0;RNA鉴别试验呈阳性反应。用高效液相色谱法测定,相对分子质量在13.7×103;增色效应50.67%。生物学活性测定结果显示:白细胞黏附抑制率41.73%。动物保护率50%,生命延长率31.62%。结论:实验提取的抗狂犬病免疫核糖核酸,经用国家颁发的iRNA质控标准对照检测,结果相同。为狂犬病治疗药物的研究奠定了实验室基础。
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目的:优化黄原胶发酵条件,提高产量。方法:初步筛选6种常用的表面活性剂,优选两种优势互补的表面活性剂进行加入量、加入时间、加入比例的优化,采用单因素和正交试验得到最佳工艺参数。结果: Tween-20、Triton X-100协同使用效果最好,发酵0h加入0.06%(v/v) TritonX-100,48h加入0.09%(v/v)Tween-20,黄原胶产量提高42.01%。结论:表面活性剂能提高
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目的:制备口服有效的鸡新城疫苗阳离子微球。方法:以鸡新城疫苗为蛋白质类药物模型,采用S/O/W法制备鸡新城疫苗PLGA/壳聚糖阳离子微球。采用血凝反应(HA)测定疫苗的效价,考察各工艺因素对疫苗活性的影响。采用血凝抑制反应(HI)测定抗体水平,对微球口服免疫效果做出初步评价。结果:鸡新城疫苗PLGA/壳聚糖阳离子微球平均粒径为4.22μm,微球表面带正电,Zeta电势为+(24.1±1.6)mV。
目的:分析羊栖菜多糖经Ca2+通路对S180荷瘤小鼠红细胞膜功能的影响。方法:建立肿瘤动物模型,分高、中、低剂量腹腔给予羊栖菜多糖7天,采集红细胞,制备红细胞悬液,运用激光共聚焦扫描技术测定荷瘤小鼠红细胞内[Ca2+]的变化;运用相关试剂盒测定红细胞膜Na+,K+-ATPase及Ca2+,Mg2+-ATPase活性的变化。结果:羊栖菜多糖能降低荷瘤小鼠红细胞内[Ca2+],增强膜表面Na+,K+-
该胶囊内容物是由壳寡糖、壳聚糖、人参皂甙及牛磺酸组成的复合物。每日给小鼠灌胃低、中及高剂量分别为0.18、0.36及1.08g/kgBW,受试物以消毒水配制,每日灌胃一次,每次0.1ml/10gBW。免疫及抗疲劳试验组分别连续灌胃33天和30天,空白对照组以消毒水代替受试物,灌胃体积与受试物相同。本品对小鼠体重及脏器系数影响不明显,试验结果均与空白对照组相比较。免疫试验表明三个剂量组抗体生成细胞数
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胰蛋白酶抑制剂是具有胰蛋白酶抑制活性的小分子多肽或蛋白质。本文采用RT-PCR和5-RACE,首次从中国林蛙皮肤总RNA中克隆出了全长胰蛋白酶抑制剂I2 cDNA,并应用生物信息学方法分析该基因的同源性及蛋白结构域。该cDNA序列全长858bp(不包括poly(A)),5端非翻译区有55bp,3端200bp(不包含poly(A)),阅读框603bp,翻译成200个氨基酸,蛋白质分子量22.4kDa
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目的:获得具有生物学活性的重组人胸腺素 1二聚体蛋白并检测其生物学功能。方法:人工合成胸腺素 1二聚体基因并克隆入原核表达载体pET-22b(+)中,转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达重组胸腺素 1二聚体蛋白(T 1②)。对表达产物进行纯化和WesternBlot检测分析以及活性检测。结果:T 1②Mr约为6.3×10 3,与理论值一致。成功纯化了T 1②蛋白,该蛋白具有与