草铵膦是世界第二大转基因作物耐受除草剂,目前市场上销售的草铵膦均是化学法合成的外消旋体混合物,但其中只有L-型具有植物毒性,其除草活性为外消旋混合物的2倍。由此L-草铵膦的使用可以减少除草剂的使用量而达到相同的除草效果,这在经济上和生态上都有很大的意义。腈的酶法水解已经广泛应用于光学活性非天然氨基酸等具有合成价值的化工产品中间体的工业生产。腈化合物的酶法水解具有反应条件温和、环境污染小、成本较低等优点,符合绿色环保和节能减排的要求。本研究目的在于用腈水解酶替代化学反应中的一步,筛选得到能够水解化学法中合成草铵膦的中间体--2-氨基4-(羟乙基甲基磷酰基)-丁腈得到L-草铵膦的产腈水解酶的菌株。本研究建立柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法拆分D,L-草铵膦,并成功实现了2种异构体在普通C18柱上分离。并通过传统的土样中筛选和基因挖掘两种方法筛选得到了一株理想的产腈水解酶的菌株。通过单因素法和正交实验对其进行了培养条件,及静息细胞转化条件的优化。本研究对现有的菌株进行克隆,并进行同源建模和分子对接技术对菌株进行分子改造进一步的提高酶活。并建立转化液中L-草铵膦分离提取工艺,为工业化应用奠定理论基础。