【摘 要】
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【目的】苯主要抑制造血系统,其活性代谢产物可诱导产生大量的活性氧(ROS),ROS所介导的氧化损伤在苯的血液毒性中起重要作用,而90%的ROS是由线粒体产生的,由此推测苯可能通过
【机 构】
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温州医科大学环境与公共卫生学院预防医学系;
【基金项目】
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浙江省自然科学基金LY13H260003;国家自然科学基金30972510
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【目的】苯主要抑制造血系统,其活性代谢产物可诱导产生大量的活性氧(ROS),ROS所介导的氧化损伤在苯的血液毒性中起重要作用,而90%的ROS是由线粒体产生的,由此推测苯可能通过影响线粒体的功能而参与血液系统的毒性作用。本研究旨在探讨苯的活性代谢产物1,4-苯醌(1,4-BQ)对人早幼粒白血病细胞系HL-60线粒体功能的影响,以丰富对苯毒作用机制的认识。【材料和方法】HL-60细胞,10%胎牛血清的RPMI-1640培养液培养,取对数生长期细胞,分别用终浓度为0、2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L的1,4-BQ处理细胞24h。CCK-8法检测细胞生存率,荧光探针2′-7′-二氯荧光黄双乙酯(DCFH-DA)检测活性氧(ROS)生成量,ATP检测试剂盒检测ATP生成量及荧光探针JC-1检测线粒体膜电位的变化。实验重复3次。【结果】CCK-8实验结果显示,不同处理浓度的细胞生存率依次为100%、109.6%、99.6%、95.7%、36.9%,可见在≤10.0μmol/L的1,4-BQ处理浓度下对细胞存活无明显影响(P>0.05),但到20.0μmol/L时,细胞存活率陡然降低(P<0.01)。ROS生成量检测结果显示,在1,4-BQ染毒浓度≤10μmol/L时,随着1.4-BQ浓度增大,ROS生成量逐渐上升,呈剂量反应关系,但在20μmol/L剂量组,ROS生成量迅速减少。ATP生成量和膜电位检测结果显示,随染毒浓度增大,ATP生成量和膜电位均逐渐降低,存在剂量反应关系。在1.4-BQ染毒浓度为10.0μmol/L时,ROS的生成量(29.13±0.15)较对照组(20.09±0.09)明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);ATP生成量是对照组的60%;膜电位不足对照组得75%。【结论】1,4-BQ在对HL-60细胞存活不产生明显影响的情况下,可诱导细胞线粒体功能失调,提示1,4-BQ介导的线粒体功能失调可能在苯的血液毒性中起重要作用。
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