【摘 要】
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草莓根腐病是一种重要的草莓根部病害,在重茬地块发生广泛,危害程度日趋加重,病害发生严重时草莓园区将面临毁灭.在世界范围内,草莓主产区已报道的根腐病病原物达20种之
【机 构】
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北京农学院植物科学技术学院,农业应用新技术北京市重点实验室,北京 102206
【出 处】
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中国植物病理学会2015年学术年会
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草莓根腐病是一种重要的草莓根部病害,在重茬地块发生广泛,危害程度日趋加重,病害发生严重时草莓园区将面临毁灭.在世界范围内,草莓主产区已报道的根腐病病原物达20种之多.北京昌平地区共报道有尖孢镰刀菌、木贼镰刀菌、茄病镰刀菌、立枯丝核菌、胶孢炭疽菌、拟盘多毛孢菌、森林腐霉等多种真菌可以引起草莓的根腐病.本课题组根据供试四种草莓根腐病菌的ITS、COI、β-tubulin等区域序列设计了66对引物,共筛选出对目标菌株特异性良好的4对引物C011-F/CO11-R、PY5-F/PY5R、SLN1-F/SLN1-R、NP3-F/NP3-R,其中尖孢镰刀菌特异性引物C011-F/C011-R的最适退火温度区间为54～60℃,最适引物添加量为1.5μl和2μl,目标片段大小为170bp；森林腐霉特异性引物PY5-F/PY5-R的最适退火温度区间为49～50℃、55～59℃,最适引物添加量为1～3—,目标片段大小为250bp；立枯丝核菌特异性引物SLN1-F/SLN1-R的最适退火温度区间为49～59℃,最适引物添加量为1～3μl,目标片段大小为420bp；棒形拟盘多毛孢特异性引物NP3-F/NP3-R的最适退火温度为49℃、55℃及56℃,最适引物添加量为0.5 ～3μl,目标片段大小为350bp.4对特异性引物可直接从土壤微生物总基因组DNA中检测到相应的草莓根腐病菌,4对引物等比例混合加入体系中,在退火温度58～60℃之间,可进行多重PCR实验,能同时检测四种病菌,得到四种不同大小的条带,可以根据不同大小条带的有无检测土壤中四种草莓根腐病菌的有无.该体系的建立能提高土壤中草莓根腐病菌的检测效率,为更好的指导田间防治打下基础.
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