蛋白质的分选和运输调控机制是生物学的热点研究领域之一。植物Rab5家族蛋白介导蛋白质从高尔基体向液泡的运输,这一过程有多个因子参与调节Rab5的活性。鸟苷酸交换因子GEF具有激活Rab5蛋白的功能,目前已报道拟南芥体内只有一个蛋白VPS9a可以激活所有Rab5家族成员,但是水稻中有两个Rab5的鸟苷酸交换因子(GLUP6/GEF和Rab5GEF2),全部可以激活OsRab5蛋白并参与谷蛋白运输,并且其生化活性稍有不同。通过对烟草基因组测序结果的生物信息学分析,生物信息学分析烟草中有两个基因(Nt VPS9a和NtVPS9b),预测其表达的蛋白含VPS9结构域,分别来源于不同烟草本氏烟草和林烟草。通过从K326叶片cDNA文库中克隆获得Nt VPS9a和Nt VPS9b全长的cDNA,同时通过DNA编辑技术制作功能缺失的ntvps9a和ntvps9b突变体,本研究结果揭示异源四倍体植物栽培烟草中Rab5的GEF生理功能,并对Rab5参与的囊泡运输机制的解析提供实验依据,为烟草中Rab5及其GEF的互作模式提供分子依据。