【摘 要】
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目的 从肿瘤相关抗原GRP78全长氨基酸序列中筛选HLA-A2.1限制性CTL表位,并对其进行鉴定.方法 生物信息学预测GRP78抗原HLA-A2.1限制性CTL表位；T2亲和力和稳定性实验分析CT
【机 构】
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中国医科大学药学院,药理教研室,辽宁沈阳,110122
【出 处】
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2015医学前沿论坛暨第十四届全国肿瘤药理与化疗学术会议
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目的 从肿瘤相关抗原GRP78全长氨基酸序列中筛选HLA-A2.1限制性CTL表位,并对其进行鉴定.方法 生物信息学预测GRP78抗原HLA-A2.1限制性CTL表位；T2亲和力和稳定性实验分析CTL表位与HLA-A2.1分子结合力及稳定性；CTL表位负载DC刺激CD3+T诱导CTL；流式细胞术分析CTL的表型；钙黄素释放实验分析CTL对肿瘤细胞和自体细胞的杀伤效应；ELISA实验分析CTL细胞IFN-γ分泌水平.结果 生物信息学预测获得5条HLA-A2.1限制性CTL表位,为GRP78-001、GRP78-002、GRP78-003、GRP78-004及GRP78-005；T2亲和力和稳定性实验结果表明GRP78-001和GRP78-002与HLA-A2.1分子具有强的亲和力和稳定性；流式细胞术分析表明GRP78-001和GRP78-002负载DC均可诱导CTL,其主要为CD8+T淋巴细胞,并产生免疫记忆；钙黄素实验结果表明GRP78-001和GRP78-002诱导的CTL对GRP78(+)HLA-A2.1(+)阳性的肿瘤细胞具有显著杀伤效应,但对HLA-A2.1阳性的自体淋巴细胞无显著杀伤作用；ELISA实验表明,GRP78-001和GRP78-002诱导的CTL分泌IFN-γ水平显著增加.结论 从GRP78抗原全长氨基酸序列中筛选出2条HLA-A2.1限制性CTL表位,GRP78-001和GRP78-002.
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