旋毛虫肌幼虫ES抗原的结构基因在cos7细胞中的表达

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利用表达载体pSV.SPORTI中,SV<,40>启动子cos7细胞中,对旋毛虫肌肉虫ES抗原的TSPGⅡ基因进行表达,用限制性内切酶EcoRI和HindⅢ从克隆载体pUTSⅡ中切出一个0.988kbTSPGⅡ基因,经EcoRI和BstXI酶切鉴定,同时表达功体也用相同的酶进行酶切, 经琼脂糖凝胶电泳,分别回收TSPGⅡ基因和pSV.SPORTI表达载体,用T<,4>DNA连接酶定向连接,转化大肠杆菌感受态细胞,挑取重组子,经EcoRIBstXI和HinkⅢ酶切鉴定,构建了重组表达质粒pSV.TSⅡ。利用脂质体作载体,将重组表达质粒转染cos7细胞,转染后48 ̄60小时。用酶联免疫吸附试验检测结果显示表达产物能与猪旋毛虫病的阳性血清反应。
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