【摘 要】
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目的 制备一种具有靶向性的载多西紫杉醇微泡,探讨该靶向载多西紫杉醇脂质微泡对人高转移肝癌MHCC-H的凋亡作用及其作用机制.方法 (1)使用薄膜水化法制得靶向载多西紫杉
【机 构】
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710032西安市,第四军医大学西京医院超声科
【出 处】
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第三届全国暨国际超声分子影像及生物效应和治疗学术会议
论文部分内容阅读
目的 制备一种具有靶向性的载多西紫杉醇微泡,探讨该靶向载多西紫杉醇脂质微泡对人高转移肝癌MHCC-H的凋亡作用及其作用机制.方法 (1)使用薄膜水化法制得靶向载多西紫杉醇微泡并考察单因素制备条件、优化其载药量包封率及微泡粒径.(2)利用亲和素将微泡表面连接CD105单克隆抗体并包裹抗肿瘤药物多西紫杉醇.通过对MHCC-H细胞进行体外寻靶实验,观察该载药微泡的靶向性.(3)将MHCC-H细胞分为空白对照组(Control),空白脂质微泡组(Blank MBs),载药微泡(DLLM)组,单纯超声(US)组,载药微泡联合超声(DLLM+US),空白脂质体联合超声组(Blank MBs+US).CCK-8法检测该靶向载多西紫杉醇脂质微泡对MHCC-H细胞的生长抑制作用；TUNEL法检测细胞凋亡情况；Western blot分别检测各组细胞的bax/bcl-2、MAPK通路蛋白和增殖细胞核抗原蛋白(PCNA)的表达情况.结果 (1)制得的载药微泡外形圆整、载药量(18±7)％,平均粒径在200～650 nm.(2)该靶向载药微泡具有体外寻靶能力.(3)CCK-8法、TUNEL法均测得细胞增殖抑制实验证实该靶向载多西紫杉醇微泡联合超声对MHCC-H有抑制其增殖、促进其凋亡的作用.DLLM+US处理可显著增强了细胞凋亡同时免疫印迹显示处理后bax/bcl-2、P53、Akt表达下降,而cyto-c、Caspase-3表达显著增强；p-ERK 1/2蛋白表达水平增多,p-p 38和PCNA蛋白表达降低.结论 靶向载多西紫杉醇微泡粒径适合用于递药；超声联合靶向载药微泡不仅可降低人高转移性肝癌MHCC-H细胞增殖期比例从而对细胞发挥其增殖抑制作用,还通过影响ERK 1/2和p38信号转导通路,激活了MHCC-H细胞的凋亡途径.
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