【摘 要】
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本课题是在报告基因技术的基础上,通过构建稳定表达特定分子的细胞,建立了抗PD-1/PD-L1抗体和抗IL-6/IL-6R抗体的生物学活性方法。1、通过构建稳定表达PD-L1分子和抗CD3单链
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本课题是在报告基因技术的基础上,通过构建稳定表达特定分子的细胞,建立了抗PD-1/PD-L1抗体和抗IL-6/IL-6R抗体的生物学活性方法。1、通过构建稳定表达PD-L1分子和抗CD3单链抗体分子的CHO细胞和稳定表达PD-1分子和NFAT驱动的报告基因的Jurkat细胞建立了抗PD-1/PD-L1抗体生物学活性方法,在细胞水平模拟了抗PD-1/PD-L1抗体的作用机理,本方法专属性、准确性和精密性良好,操作简单,耗时较短,已完成对7家企业的技术培训,完善了此类抗体的质控标准,为抗PD-1/PD-L1抗体的研发提供了帮助。2、构建了表达荧光素酶报告基因的IL-6生长依赖性DS-1-SIE细胞,通过报告基因是否表达来验证抗IL-6/IL-6R抗体的阻断效果。初步建立了抗IL-6/IL-6R抗体的生物学活性方法,本方法经过优化,呈现出较好的剂量反应曲线。本方法耗时短,且方法简便,可以解决传统方法实验周期长、步骤繁琐等问题。
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