【摘 要】
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为弄清本实验室构建的鸭α-干扰素基因疫苗(pcDNA-SDIFN-α)在免疫鸭体内动态分布规律及其存留时间,为pcDNA-SDIFN-α的临床应用研究提供基础数据,本文将50、100和200μgpcDNA-SDIFN-α分别肌肉注射28日龄樱桃谷肉鸭,设PBS和空载体质粒pcDNA3.1(+)对照,建立并应用TaqMan探针实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测不同时间点pcDNA-SDIFN-α
【机 构】
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四川农业大学动物医学学院禽病防治研究中心,四川雅安 625014 四川农业大学动物医学学院禽病防治
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛
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为弄清本实验室构建的鸭α-干扰素基因疫苗(pcDNA-SDIFN-α)在免疫鸭体内动态分布规律及其存留时间,为pcDNA-SDIFN-α的临床应用研究提供基础数据,本文将50、100和200μgpcDNA-SDIFN-α分别肌肉注射28日龄樱桃谷肉鸭,设PBS和空载体质粒pcDNA3.1(+)对照,建立并应用TaqMan探针实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测不同时间点pcDNA-SDIFN-α在血液以及各组织器官(心脏、肝脏、脾脏、肺脏,肾脏、脑、胸腺、哈氏腺、法氏囊、胰脏、十二指肠、空肠、回肠、直肠、盲肠和肌肉接种部位的组织)含量。结果表明:①建立的FQ-PCR具有特异性强、灵敏度高、快速等特点,pcDNA-SDIFN-a初始核酸模板浓度与Ct值之间相关系数为0.999,呈较好的线性关系；②各剂量pcDNA-SDIFN-α免疫鸭1h即可在血液及各组织中均检测到,注射部位含量最高,显著高于除心脏外的其它样品；③在除血液外各组织器官中pcDNA-SDIFN-α的含量在1d时均已达到最高,随后逐渐减少,免疫后1d-3d期间减少速度最快；④105d时各组织器官中均能检测到,但含量已仅有102拷贝数左右,其中注射部位减少最明显(达6个数量级)； ⑤血液中pcDNA-SDIFN-α含量一直较低,变化差异不显著；⑥不同剂量免疫组各组织器官中pcDNA-SDIFN-α的含量的总体规律为200μg组＞100μg组>50μg组,但差异不显著。因此pcDNA-SDIFN-α肌肉注射能迅速分布到鸭体各组织器官中并持续存在105d以上。
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利用粗木聚糖半纤维素为唯一碳源,从牛羊瘤胃内容物、玉米地秸秆周围的土壤等样品中分离得到2株产木聚糖酶省活力较高的芽孢杆菌菌株L2-19和Y25.经形态、生理生化鉴定,初步确定两株菌分别为短小芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌.同时,研究了碳源、氮源等因素对该菌产木聚糖酶的影响及2株菌的安全性。结果表明,L2-19菌株以麸皮为最佳碳源,酵母膏为最佳氮源;Y25菌株以麸皮为最佳碳源,(NH4)2SO4为最佳氮源.
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