【摘 要】
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文中主要研究了T-2毒素在动物体内的代谢转化过程,明确催化关键代谢步骤的酶,阐明其催化机制和调控机理,对于减少T-2毒素对畜禽甚至人类的危害有着重要的理论指导意义.羟化反
【机 构】
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广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室,华南农业大学生命科学学院
【出 处】
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全国农业生物化学与分子生物学第十四届学术研讨会
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文中主要研究了T-2毒素在动物体内的代谢转化过程,明确催化关键代谢步骤的酶,阐明其催化机制和调控机理,对于减少T-2毒素对畜禽甚至人类的危害有着重要的理论指导意义.羟化反应是T-2毒素在动物体内发生的主要代谢反应之一，研究表明T-2毒素的3-羟化反应是由细胞色素P450氧化酶(cytochrome P450,CYP)催化的，但具体是何种亚型参与其中并不清楚。本研究在此基础上，利用不同CYP的抑制剂筛选参与T-2毒素轻化代谢的亚型，发现猪CYP3A家族基因可能参与T-2毒素3’-羟化代谢。此外，基因芯片和定量PCR实验结果显示T-2毒素处理能显著提高猪CYP3A46和CYP3A22的表达量。进一步利用真核和原核体外重组表达体系获得了具有催化活性的重组CYP3A46和CYP3A22蛋白，并首次揭示CYP3A46和CYP3A22能催化T-2毒素发生3’-羟化反应。利用荧光素酶报告基因系统、凝胶阻滞、染色质免疫沉淀等多种实验方法和手段，进一步揭示了CYP3A46和ACYP3A22的本底及诱导表达调控机制。
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