在体流式细胞仪(In vivo flow cytometry,IVFC)是一种在活体水平上用于生命科学基础研究的光学仪器.该仪器在高速影像和体外流式细胞仪技术的基础上创新性地实现在体、实时、动态、高灵敏、无损监测小动物血液循环中的荧光细胞(如循环肿瘤细胞/干细胞),并定量分析.本文研制了同时拥有785nm(近红外)和488nm(可见光)激发光的双通道在体流式细胞仪。采用785nm激光器用于激发近红外染料，488nm激光器用于激发可见光区域的荧光染料或者蛋白质，例如GFP或者DiO等。两束激光被耦合进光纤内并通过透镜准直，然后通过反射镜和分光镜整合到同一个光轴上。激光会分别通过柱透镜，机械狭缝，消色差透镜，然后聚焦到焦平面上。焦平面上的激光束覆盖深度大约为50μm，两束激光聚焦的位置相同，可以实现双通道同时检测。焦平面出产生的激光通过物镜收集并通过一个50/50反射的分光镜反射。然后通过分光片将荧光分别反射到光电倍增管PMT中。PMT前方有一个透镜和狭缝，这样的共聚焦结构保证了只有焦平面的荧光可以进入检测器中。PMT的作用是将光信号转换为电信号，然后通过信号放大器和数据采集卡将信号记录下来。