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目的:本研究探讨磷酸二氢钾对牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨向分化能力的影响。方法:(1)取正畸需要拔除的新鲜离体前磨牙,通过酶消化法分离培养PDLSCs,流式细胞术(FCM)检测STRO-1、CD90、CD105、CD34、CD45等间充质干细胞标志。(2)制备含1.8 mmol/L磷酸二氢钾(KH2PO4)的条件培养基,将PDLSCs培养于KH2PO4条件培养基中作为实验组,培养于完全培养基中作为对照组。采用CCK8绘制两组细胞生长曲线,检测磷酸二氢钾对PDLSCs增殖能力的影响;两组细胞分别培养1d和3d,检测各组碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;分别培养3d和7d,提取两组总蛋白和m RNA,蛋白免疫印迹实验(western blot)检测骨向分化相关蛋白(OCN,OSX,RUNX2等)的表达情况,实时定量逆转录聚合酶链反应实验(real-time RT-PCR)检测骨向分化相关基因(ALP,OCN,OSX,RUNX2等)的表达情况;两组细胞培养14d时茜素红染色检测钙结节形成情况,氯化十六烷基吡啶(CPC)溶解钙离子进行定量检测。结果:(1)FCM结果显示牙周膜干细胞阳性表达STRO-1、CD90和CD105等间充质干细胞标记物,阴性表达CD34和CD45。(2)CCK8结果显示KH2PO4实验组对PDLSCs增殖能力有一定的抑制作用。ALP活性检测结果显示培养1d后两组ALP活性无统计学差异(P>0.05);培养3d时KH2PO4实验组ALP活性显著高于对照组(P<0.01)。实验组成骨向分化相关基因及蛋白(ALP,OCN/OCN,OSX/OSX,RUNX2/RUNX2等)表达水平在3d和7d时均较对照组显著升高(P<0.01)。培养14d后茜素红染色结果显示KH2PO4实验组矿化结节形成显著多于对照组,实验组钙离子浓度为(1.972±0.039)μg/g显著高于对照组(0.114±0.018)μg/g,P<0.01。结论:本实验通过1.8 mmol/L磷酸二氢钾刺激体外培养的PDLSCs,检测PDLSCs成骨向分化的相关指标,明确了磷酸二氢钾可以明显促进人牙周膜干细胞的成骨分化能力,为进一步深入探索牙周组织再生修复提供一定的参考,为后续临床应用提供实验依据。