肝细胞生长因子对牙乳头细胞迁移能力的影响及其机制研究

来源 :全国第八次牙体牙髓病学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhanghongyingyxl
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  研究目的:肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一种多效生长因子,在牙胚发育过程中起着重要的作用,本实验对其在牙乳头细胞(human dental papilla cells, hDPCs)迁移中的作用及机制进行了初步研究.材料和方法:以体外培养的hDPCs为实验对象,phalloidin染色观察HGF对hDPCs骨架的影响,Vinculin免疫荧光观察HGF对hDPCs粘附斑的影响,Transwell小室实验和细胞划痕实验研究HGF对hDPCs迁移能力的影响.运用Western Blot技术研究HGF对hDPCs迁移相关信号分子如p-Paxilllin、p-MLC的表达情况,相关信号通路如p-JNK、p-ERK的激活情况和对RhoA活化的情况.分别采用SP600125、U0126、Y-27632特异性阻断JNK、ERK、ROCK通路后,观察HGF对hDPCs细胞骨架、迁移能力的影响.结果:细胞骨架和Vinculin免疫荧光结果显示:迁移过程中,对照组hDPCs弹力纤维逐渐变细,丝状伪足较多,粘附斑较多而小;经HGF处理后,hDPCs弹力纤维均较粗,片状伪足较多,粘附斑较大而少. Transwell小室实验和细胞划痕实验结果显示HGF促进hDPCs的迁移能力.Western blot结果提示在HGF的作用下,p-MLC,p-Paxilllin的表达明显上调,ERK、JNK、RhoA等与细胞迁移密切相关的通路也均被激活,提示这三个信号通路均参与HGF调节hDPCs迁移能力. SP600125能明显抑制hDPCs的迁移能力,HGF能部分恢复;U0126对hDPCs迁移能力作用不明显;Y-27632能明显抑制hDPCs迁移能力,也能被HGF部分恢复.结论:HGF可明显促进hDPCs的迁移能力,RhoA、JNK通路在其中起到介导作用,ERK通路与HGF促进hDPCs迁移能力关系不密切.
其他文献
会议
会议
会议
会议
会议
会议
会议
目的:获得原核表达的人成牙本质细胞样细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性蛋白,并制备其多克隆抗体。方法:采用RT-PCR技术从人成牙本质细胞样细胞系中获得cDNA,亚克隆至PUC18载体中,经测序确证后,将该基因插入原核表达载体pProEXHTb中,以IPTG诱导蛋白的表达,SDS-PAGE鉴定。用纯化的抗原制备多克隆抗体并进行Weatern-blot检测。结果:获得的人成牙本质细胞样细胞L型钙
目的:研究牙周损伤对骨髓血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)动员、趋化的影响,探讨EPCs在牙周损伤修复过程中的作用及机制.方法:建立Wistat大鼠牙周损伤动物模型,术后2、4、6、12、24、48h用Percoll分离外周血单核细胞,流式细胞仪检测CD 133、CD31阳性细胞含量;酶联免疫法检测外周血VEGF变化情况.培养细胞并鉴定表型,于动物
会议
目的:尝试开发新的磁性纳米转基因载体,探讨其介导BMP-2基因对体外培养的人牙髓细胞增殖及向成牙本质细胞分化的作用.方法:采用碱性共沉淀法合成单分散Fe3O4@PEI+磁性纳米微粒,表面修饰正电荷,分别与质粒pACCMV-EGFP,pACCMVBMP-2通过静电作用复合.在外加磁场做用下转染DPCs,以PEI和lipofectin作为对照组.荧光倒置显微镜观察EGFP的表达,通过流氏细胞仪检测转染