论文部分内容阅读
本研究通过分析宫内生长受限(IUGR)和正常胎猪肝脏microRNA (miRNA)表达的差异揭示了IUGR对胎猪肝脏miRNA表达谱的影响.试验选用6头健康初产达兰(Dalland)母猪,在妊娠期第1 10天致死,利用子宫切除术取得整个子宫.称量每头胎猪体重,按照体重低于窝平均体重两个标准差的标准,在每窝中选取1头IUGR胎猪和1头正常胎猪.取出的左叶肝脏洗去血液后置于液氮中,5min后转存于-80℃冰箱备用.利用双荧光标记miRNA芯片技术对IUGR和正常胎猪肝脏中的miRNA丰度进行分析.将表达差异的miRNA录入互联网上的miRNA靶基因预测和通路分析软件(http://starbase.sysu.edu.cn/miRPathway.php),对表达差异的miRNA进行靶基因预测及其所属生物过程聚类分析.结果表明:IUGR对胎猪肝脏miRNA的表达产生显著影响,共有41种miRNA存在表达差异.相对于正常胎猪,共有27种miRNA在IUGR胎猪肝脏中表达上调,其中包括:hsa-let-7d、hsa-let-7f、hsalet-7g、hsa-miR-122、hsa-miR-125b、hsa-miR-126、hsa-miR-130a、hsa-miR-152、hsa-miR-16、hsa-miR17、 hsa-miR-191、hsa-miR-193 a-3p、 hsa-miR-26a、hsa-miR-29a、 hsa-miR-29b、 hsa-miR-30b、 hsa-miR30e、hsa-miR-320c、hsa-miR-374a、hsa-miR-421、hsa-miR-423-3p、hsa-miR-451、mmu-miR-193b和mmu-miR-20a等;14种表达下调,其中包括:hsa-miR-1249、hsa-miR-1281、hsa-miR-26a-2*、hsa-miR299-5p、hsa-miR-483-3p、hsa-miR-604、hsa-miR-876-3p、hsa-miR-885-5p和hsa-miR-943等.我们根据表达差异miRNA所涉及的代谢过程和信号通路的功能和作用,将其分为三大类:营养物质的吸收与代谢(包括:胰岛素信号通路、谷氨酰胺和谷氨酸代谢以及Wnt信号通路)、肝脏解毒过程(包括:内吞作用、泛素调节的蛋白质降解)和肝细胞的生长增殖(包括:转化生长因子β信号通路、mTOR信号通路、MAPK信号通路和细胞周期).IUGR胎猪肝脏中miRNA的表达上调会使其靶标mRNA的翻译过程受到抑制,进而导致编码的蛋白质在肝脏中表达量下降;相反miRNA的表达下调则会导致相应蛋白质的表达量升高.结果提示,IUGR会对胎猪肝脏miRNA的表达产生显著影响.这些miRNA表达变化所导致的胎猪葡萄糖吸收代谢紊乱、脂肪代谢紊乱、蛋白质合成过程受阻;肝脏解毒能力下降以及肝脏细胞增殖抑制,可能是造成IUGR仔猪出生后营养利用率低、患病率和死亡率高以及生长发育不良的重要原因.