【摘 要】
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本研究通过对多种鸡球虫和松鼠球虫18S rRNA和28S rRNA进行序列比对分析,在18S rRNA3’端和28S rRNA5,端保守区设计艾美耳属通用引物,以兔源艾美耳球虫卵囊基因组DNA为模板,通过PCR和分子克隆技术国内外首次成功克隆到斯氏艾美耳球虫、肠艾美耳球虫、黄艾美耳球虫、大型艾美耳球虫、中型艾美耳球虫和无残艾美耳球虫等6种兔球虫完整的ITS l-5.8S rRNA-ITS2序列,G
【机 构】
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河南科技大学动物科技学院动物检疫实验室,洛阳471003;河南省动物疫病防控与公共安全院士工作站,洛阳471003
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会
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本研究通过对多种鸡球虫和松鼠球虫18S rRNA和28S rRNA进行序列比对分析,在18S rRNA3’端和28S rRNA5,端保守区设计艾美耳属通用引物,以兔源艾美耳球虫卵囊基因组DNA为模板,通过PCR和分子克隆技术国内外首次成功克隆到斯氏艾美耳球虫、肠艾美耳球虫、黄艾美耳球虫、大型艾美耳球虫、中型艾美耳球虫和无残艾美耳球虫等6种兔球虫完整的ITS l-5.8S rRNA-ITS2序列,GenBank收录号为JQ328190,JX406873～JX406877.兔源艾美耳球虫ITSl/2序列高度变异,与鸡球虫、啮齿动物球虫的序列同源性低于60％,但是该序列种特异性很强.为分子诊断兔球虫特别是强致病种提供思路和启发.在斯氏艾美耳球虫、肠艾美耳球虫和黄艾美耳球虫ITSl/2序列超变区设计种特异引物,通过优化引物浓度、退火温度等条件,特异性试验和敏感性试验,建立了灵敏、特异和快捷的多重PCR检测方法,一次PCR反应可以同时检测兔粪便样品中斯氏艾美耳球虫、肠艾美耳球虫和黄艾美耳球虫3种强致病种.本研究结果将为兔球虫强致病种的临床诊断和揭示兔球虫种群遗传特征提供有效的分子工具.
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