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如何精确表征蛋白质，特别是界面蛋白质的分子结构是理解蛋白质结构演变的关键，是国内外学者共同面临的一个非常重要的难题。针对该难题，我们发展了界面光谱多谱带协同表征方法，首次利用和频光谱技术成功测出了常规手段无法测量的界面蛋白质酰胺 Ⅲ 信号。虽然 -螺旋与无规卷曲结构的酰胺 I 谱带振动峰都位于 1655 cm-1左右，但在酰胺 Ⅲ 谱带区域，它们的振动峰分别位于 1260 cm-1以上和 1260 cm-1以下，研究发现两种结构所对应的酰胺 Ⅲ 谱带特征峰面积比与蛋白质中无规卷曲结构含量成线性关系。将酰胺 Ⅰ 和酰胺 Ⅲ 信号结合起来，解决了如何区分界面蛋白质 -螺旋与无规卷曲结构这一界面蛋白质多年的难题，同时获得界面蛋白质的三维结构信息。