P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)是一种ATP依赖性的跨膜转运蛋白，可以将多种结构和药效不同的化合物排出细胞，是产生多药耐药的主要原因之一。目前P-糖蛋白在多要耐药方面的研究主要集中在肿瘤及难治性癫痫的发生，其中肿瘤的发生是原癌基因的激活、抑癌基因的抑制、凋亡基因及修复基因的改变等多因素综合作用的结果，而P-糖蛋白的升高是癫痫发展为难治性癫痫的重要生物学基础，因此，P-糖蛋白在难治性癫痫中的作用机制研究尤为重要。目前关于P-糖蛋白基因调控及相应的信号传导通路成为P-糖蛋白的研究热点，但是P-糖蛋白处于不断的合成与降解的动态平衡，因此，从P-糖蛋白降解的角度揭示P-糖蛋白在多药耐药中的作用机制是一个新思路。目的研究神经细胞内P-糖蛋白的降解途径并探讨P-糖蛋白在神经细胞内降解对难治性癫痫治疗的临床意义。方法1.腺病毒作为载体，将ABCB1基因转染到U251细胞，建立高表达P-糖蛋白的细胞模型。2.在已建立的高表达P-糖蛋白的细胞模型上，不同浓度的特异性蛋白酶体抑制剂MG132、溶酶体抑制剂ChlQ处理细胞24h，同时设定时间依赖组。Western blot检测P-糖蛋白水平的变化情况，明确神经细胞内P-糖蛋白的降解途径。结果1.蛋白酶体抑制剂MG132处理组，P-糖蛋白在蛋白酶体抑制剂处理后表达明显升高，且P-糖蛋白表达随着MG132浓度的升高而升高。P-糖蛋白表达与蛋白酶体抑制剂处理时间无明显相关性，但是蛋白酶体抑制剂处理可以明显增加P-糖蛋白的表达。2.溶酶体抑制剂ChlQ处理组，P-糖蛋白的表达与对照组相比无明显异常，且不随溶酶体抑制剂浓度及处理时间变化而变化。结论1.神经细胞内P-糖蛋白的降解与溶酶体途径无关。2.神经细胞内P-糖蛋白的降解通过泛素-蛋白酶体途径。3.抑制泛素-蛋白酶体功能可以增加神经细胞内泛素化P-糖蛋白的含量，引起神经细胞内P-糖蛋白积聚。