KLK6、KRT 13在口腔疣状癌中的表达的研究

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口腔疣状癌(oral verrucous carcinoma,OVC)是一种不同于口腔鳞状细胞癌,并有着独特病理学特征和生物学行为的恶性疾病,其发病机制尚不清楚。本研究通过对前期试验中DNA甲基化芯片及全基因组芯片表达差异基因的分析,从中选取目的基因进行进一步的研究。采用实时荧光定量PCR和免疫组化技术探讨口腔疣状癌KLK 6、KRT13基因的表达情况,为进一步探讨OVC发生的分子机制和治疗靶标奠定基础。目的:通过对前期口腔疣状癌DNA甲基化芯片及全基因组芯片表达差异基因进行分析,初步验证芯片准确性,并探索KLK6、KRT13基因在口腔疣状癌中的表达情况。方法:收集4例口腔疣状癌癌组织及相应患者的正常粘膜组织、癌旁组织,采用实时荧光定量PCR验证KLK6、KRT13基因在组织中的表达情况,随后通过免疫组织化学方法对19例口腔疣状癌、26例口腔鳞癌和14例正常口腔粘膜KRT13的蛋白表达进行检测,通过统计学分析,获得KRT13蛋白在不同组织表达差异情况。结果:实时荧光定量PCR结果显示KLK6在口腔疣状癌、癌旁、正常组织(方法段落中并没有说有癌旁组织,有问题)中的表达依次降低,但差异无统计学意义(P>0.05);KRT13在口腔疣状癌中的表达低于正常组织且有差异统计学意义(P<0.05),在癌旁与正常、癌与癌旁组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。KRT13蛋白在口腔疣状癌表达阳性率为57.89%(11/19),口腔鳞癌中为26.92%(7/26),正常粘膜组织92.86%(13/14),在三组中的表达差异具有统计学意义(P<0.05);其中KRT13阳性率在外生型口腔疣状癌组织中为87.50%(7/8)、囊肿/浸润型为36.36%(4/11)、口腔高分化鳞癌为54.55%(6/11)、口腔中低分化鳞癌组织为6.67%(1/16);其中,在口腔疣状癌外生型与囊肿/浸润型、口腔鳞癌低分化组织中表达差异均有统计学意义(P<0.05),在口腔鳞癌高分化与中低分化组织中的表达差异亦有统计学意义(P<0.05),在口腔鳞癌高中分化与口腔疣状癌外生型、口腔鳞癌中低分化与口腔疣状癌囊肿/浸润型表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.KRT 13mRNA在口腔疣状癌中为低表达,与前期基因芯片结果相符,其蛋白表达亦比正常粘膜低,说明KRT 13在口腔疣状癌中的发生发展中可能发挥某些作用;KLK6 mRNA在口腔疣状癌表达与正常组织无差异,其在口腔疣状癌中的作用还需进一步研究。2.KRT 13蛋白在疣状癌及鳞癌组织中的表达与临床或病理分型有关;3.KRT 13蛋白可能作为一个疣状癌及鳞癌预后相关因子对患者预后进行评估,并为口腔疣状癌的基因治疗靶点的研究提供一定参考价值。
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