生物钟PER1基因在口腔鳞癌中的昼夜节律变化及与体内肿瘤生长的关系研究

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目的:探讨生物钟PER1基因在口腔鳞癌中的昼夜节律变化情况和与肿瘤体内生长的关系。方法:60只裸鼠置于12h光照和12h黑暗交替环境中饲养3周后,将人颊鳞癌BcaCD885细胞接种于裸鼠颊部,建立口腔颊鳞癌模型。3周成瘤后,在24h内按灯亮后(Hours after light onset,HALO)4、10、16、22h (即4HALO、10HALO、16HALO、22HALO)的4个时间点分别处死15只裸鼠,取出肿瘤,称重,常规切片,在HE染色下计算各时间点肿瘤细胞的有丝分裂指数(MI);分别用SP免疫组化、Western blot和Real-time RT-PCR检测各时间点癌细胞中PER1蛋白和mRNA的表达;分别用方差分析和余弦分析检验各指标在4个时间点的差异性及是否具有昼夜节律性。结果:颊鳞癌细胞PER1蛋白、PER1mRNA、肿瘤MI和肿瘤重量在昼夜不同时间点具有显著性差异(P<0.01),其变化波动具有昼夜节律性特征(P<0.05);肿瘤MI和肿瘤重量与PER1的表达水平呈反比关系,PER1mRNA表达的峰值与肿瘤MI和重量的谷值均位于活动相的中期,而PER1mRNA表达的谷值与肿瘤MI和重量的峰值均位于休息相中期。结论:口腔鳞癌中PER1的表达、肿瘤MI和重量在昼夜不同时间点的波动具有24h昼夜节律性,PER1在口腔鳞癌中可能为重要的抑癌基因。
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