微生物絮凝菌的固定化及混合菌种培养

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微生物絮凝剂(Microbial Flocculant,MBF)是微生物生长过程中产生的一类次生代谢产物,可絮凝,沉淀水体中的悬浮颗粒、菌体细胞及胶体粒子。由于其具有易生物降解、对环境和人类无害等特点,微生物絮凝剂已成为絮凝剂研究的一个新热点。微生物固定化技术具有细胞密度高、反应速度快、稳定性强、耐毒害能力强、微生物流失少、产物分离容易和剩余污泥少等优点,因此在废水处理中受到重视并得到广泛的应用。为了使微生物絮凝剂在实际中能更好的应用,本论文将絮凝菌与微生物固定化技术结合运用,并对混合絮凝菌株产生的微生物絮凝剂进行了研究。本文在实验室经过多重筛选和富集,分离出3株高效絮凝剂产生菌株,分别命名为X-1,X-2,X-3,其中X-1的絮凝效率最佳。在最优絮凝条件,即5ml的菌液投加到100ml pH为8.0的5%高岭土中,添加4ml的1%CaCl2,沉降15min时,其絮凝率可达到83.45%。选取X-1作为研究菌株,海藻酸钠、聚乙烯醇(PVA)、海藻酸钠与聚丙烯酰胺的复合物作为固定化载体,以固定化载体的浓度、微生物与载体的重量比、交联时间、交联剂的浓度为影响因素,进行了L9(34)正交实验,以悬浮菌种作为对照试验,寻找出影响因素的重要性顺序及最佳的固定化条件。为了进一步提高固定化的菌种颗粒的絮凝性,首先对絮凝菌液用硅藻土或活性碳进行物理吸附,再用固定化载体包埋,然后对成形的固定化颗粒进行化学处理,以增强其机械性能。试验还对固定化细胞的絮凝条件进行了研究,找出最佳的絮凝条件;并用电镜观察固定化菌种颗粒的内部结构,以进一步了解不同固定化载体的结构对微生物絮凝剂的影响。经过实验证明:海藻酸钠和聚丙烯酰胺(PAM)组成的复合载体固定菌株能取得最佳絮凝性。最佳固定化条件为:2%海藻酸钠和3%PAM,包埋菌种与载体体积比为1∶1,质量分数为4%的CaCl2作为交联剂,交联剂的pH为6,交联温度为25°C。加入吸附剂活性炭时,其絮凝性提高,当活性碳的量为0.4g/(10ml湿菌种)时,达到最高絮凝率94.23%,比悬浮菌液,海藻酸钠固定菌种,PVA固定菌种的絮凝率分别提高了10.7%,2.46%,6.44%。且最佳絮凝条件为:高岭土的最初pH值为9,沉降时间为15min,最佳助凝剂投加量为4ml/(100ml5%高岭土悬浮液),絮凝菌菌液投加量为1ml/(100ml5%高岭土悬浮液)。将筛选出的三种菌种,进行不同方式的搭配混合培养,测混合菌种的絮凝效果。发现X-1+X-2(后称J-1)的絮凝性最佳,要高于各菌种单独发酵所得的发酵液的絮凝效果,絮凝率可达到87.56%。
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