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固有免疫系统是生物体抵抗外源微生物侵染的第一道防线,也是激活获得性免疫反应的先决条件。宿主细胞基因组直接编码的模式识别受体(PRR)识别微生物特异性结构PAMP,激活特定的信号分子,诱导产生大量的I型IFN和炎症因子,引发多种免疫反应。本文通过对特定的cDNA文库进行大规模筛选,找到了新的参与固有免疫反应的分子ERIS(ER IFN stimulator),并对其所参与的信号途径和作用机制进行了研究。
ERIS是一个跨膜蛋白,曾有报道称它可以通过活化ERK通路,参与MHC II介导的细胞凋亡途径。经研究发现,ERIS在固有免疫抗病毒反应中发挥着重要作用。在HEK293细胞中,ERIS的过量表达可以强烈激活IFNβ和白介素等免疫和炎症相关因子的表达,诱导多种抗病毒蛋白的产生。ERIS siRNA可以抑制poly(I:C)和poly(dA:dT)转染引起的IFNβ的产生,说明它参与了胞内抗RNA和IDNA病毒反应途径。
ERIS在多种组织和细胞中都普遍表达,可以抑制病毒复制。免疫荧光及细胞组分分离实验显示,ERIS在胞内定位于内质网。它的正确定位对功能的正常行使至关重要。根据前人的报道,本文发现并通过实验证实了ERIS跨膜区附近的R76I77R78和R178Y179R180是其内部的内质网滞留序列。RIR和/或RYR的缺失会导致ERIS在胞内弥散分布,并在胞质中被未知蛋白切割,因此它们对ERIS在内质网的定位和维持蛋白稳定性是必需的。
当细胞受到仙台病毒感染或polyq(I:C)、poly(dA:dT)转染等免疫刺激时,ERIS会形成明显的寡聚体。本文通过制备一系列ERIS的缺失体或截短体,证实了其中跨膜结构域是寡聚体形成所必需的。此外,ERIS还可以发生泛素化和磷酸化修饰作用。
已知Streptomyces产物香豆霉素可以以1:2的比例结合细菌DNA促旋酶的B亚基GyrB,形成GyrB天然二聚体。本文制备了ERIS—GyrB融合蛋白,并用香豆霉素诱导ERIS发生二聚化,发现此二聚体可激活ERIS介导的信号通路,从而阐明了ERIS的抗病毒反应机制。
综上所述,本文找到并克隆了固有免疫信号通路新成员ERIS,并对其功能、定位和作用机制进行了初步的研究。但是,很多问题仍然未知,如ERIS在信号通路中的上游和下游分子、它如何被激活而传递信号以及它与已知的参与固有免疫反应的分子之间的相互作用和关系等。对这些问题的研究将有助于进一步了解ERIS在固有免疫反应中的作用,扩展人们对抗病毒机制的认识。