研究背景记忆是人脑对经历过的事物的反映,包括识记、保持、再认和回忆四个基本过程。记忆减退即是上面四个过程的普遍减退,也称健忘。老年人的记忆力减退包括器质性健忘和功能性健忘两类。老年人由于年龄增长发生记忆力减退是常见现象,属于功能性健忘。随着年龄的增长出现老年性神经系统疾病,尤其以老年痴呆性疾病为代表的记忆力减退疾病,属于器质性健忘。近年来我国老龄人口数逐年上升,根据国际通行的判断标准,当一个城市或国家60岁以上人口所占比重达到或超过总人口数的10%,就进入老龄化社会,1999年我国开始进入老龄化社会,2014年我国老年人口达2亿。[11老年入学习记忆能力减退的相关疾病的发生率逐年上升。健忘是老年人的常见多发疾病,尤其以脑供血不足导致的健忘最为常见,人脑学习记忆能力减退为健忘症的主要表现。许多中老年人及其家人正在经受脑缺血引起记忆力减退所带来的痛苦,同时也为整个社会带来巨大的经济负担。研究目的在中医学关于健忘的文献研究的基础上,探索从心、肝、肾论治中医学对健忘的认识,用疏肝、补肾、行气活血的方法来治疗健忘,发掘常用治疗健忘中药的使用规律。并在方剂生慧汤的基础上,在师门研究基础上结合导师临床经验拆方建立了田七、天麻、益智仁药组的中药组方,通过谷氨酸损伤的胎鼠海马神经元细胞,及小鼠水迷宫行为学观察研究结果,探讨田七、天麻、益智仁药组保护组对记忆力减退的干预机制,该研究思路对老年患者的脑功能恢复保健有积极意义。研究方法1.通过关于中医对健忘的相关文献整理及统计研究,探讨疏肝、补肾、行气活血方法在预防健忘中的作用。2.通过谷氨酸损伤海马神经元模型的建立,研究田七、天麻、益智仁药组对Glu损伤胎鼠海马神经元的保护作用。3.田七、天麻、益智仁药组对东莨菪碱损伤造成的小鼠学习和记忆功能下降的预防作用进行研究。将小鼠分组进行实验,小鼠在正常水平下分6组接受不同的中药剂量干预操作,空白对照组小鼠灌服双蒸水,中药组(低组、中组和高组)、西药组各组小鼠灌服相应药物,采用莫里斯水迷宫进行行为学测试,通过检测海马组织胆碱乙酰基转移酶、单胺氧化酶的活性含量,探讨田七、天麻、益智仁药组对小鼠记忆力减退的保护作用。研究结果(1)实验研究一中,MTT法测田七、天麻、益智仁药组对Glu损伤神经元细胞OD值及存活率的测定结果显示,与正常组相比,Glu损伤后细胞活性显著下降(P<0.05)；田七、天麻、益智仁药组保护组中剂量组与Glu损伤组相比细胞活性明显升高(P<0.05)。平均值田七、天麻、益智仁药组中剂量组对Glu损伤的神经元细胞保护作用与尼莫地平组的保护作用接近,优于正常组及模型组。(2)谷氨酸损伤海马神经元的实验中免疫荧光法结果,在标记GABA的神经元细胞中,统计分析结果表明模型组平均总光密度值低于正常组(P<0.05),药组保护组平均总光密度值高于Glu损伤组(P<0.05),正常组、田七、天麻、益智仁药组、尼莫地平组平均总光密度值接近,说明保护组中GABA的含量与正常组接近,并且高于Glu损伤模型组。在标记CAMKII的神经元细胞中,统计分析结果表明模型组平均总光密度值高于正常组(P<0.05),保护组平均总光密度低于Glu损伤组(P<0.05),正常组、田七、天麻、益智仁药组、尼莫地平组总光密度接近,说明保护组中CAMKII受体量与正常组接近,并且较Glu损伤模型组少。(3)高剂量的田七、天麻、益智仁药组能够改善正常小鼠水迷宫的学习成绩(即逃避潜伏期(P<0.05),低、中剂量组效果不显著(P>0.05)；而且田七、天麻、益智仁药组高剂量组小鼠海马组织胆碱乙酰基转移酶活性明显升高(P<0.01),乙酰胆碱酶活力降低和Western blot海马组织胆碱乙酰基转移酶蛋白表达升高(P<0.05)。与对照组比较,东莨菪碱组小鼠水迷宫的学习和记忆成绩均下降,海马组织内胆碱乙酰基转移酶活性降低和血清单胺氧化酶活性升高,提示记忆障碍模型成立。田七、天麻、益智仁药组中、高剂量组小鼠水迷宫的学习和记忆成绩(即经过平台的次数和平台象限停留时间)均优于模型组,尤以高剂量组最为显著；田七、天麻、益智仁药组高剂量组小鼠海马组织胆碱乙酰基转移酶,活性明显增高(P<0.05)表现在：明显缩短小鼠在水迷宫中的逃避潜伏期(P<0.05),延长小鼠在平台象限停留的时间(P<0.05),提高小鼠海马组织胆碱乙酰基转移酶的活性(P<0.05)。研究结论本研究在挖掘古代文献的基础上,对疏肝、补肾、行气活血方法来改善记忆力进行了探讨研究,以探寻干预记忆力减退的有效方法,并对近10年来临床上常用的改善记忆力的中药方药进行了整理并分析统计。研究结果发现对疏肝、补肾、行气活血方法为临床上常用的改善记忆力的治疗方法,其中天麻、田七、益智仁的使用频率较高,后在师门研究基础上选三味中药组成田七、天麻、益智仁药组,以探讨疏肝、补肾、行气活血方法改善人们学习记忆力的作用机理。研究发现人们学习记忆能力是受多方面、多系统影响。田七、天麻、益智仁药组能达到调节神经递质的作用以保护小鼠记忆力。研究结果表现田七、天麻、益智仁药组能有效干预模型小鼠的记忆能力,通过对研究结果分析田七、天麻、益智仁药组对记忆力减退的干预作用机理可能是通过中枢胆碱能神经系统及拮抗Ca2+来实现的。高剂量组田七、天麻、益智仁药组可改善东莨菪碱所致记忆障碍小鼠的学习记忆能力,其机制与田七、天麻、益智仁药组用于提高海马组织胆碱乙酰基转移酶活性,从而促进其脑内合成,减少乙酰胆碱分解有关。田七、天麻、益智仁药组可以通过调节神经递质GABA、CAMKII受体活性起到对谷氨酸损伤的海马神经元细胞的干预保护。