川陈皮素是一种多甲氧基黄酮,存在于柑橘类果皮中,具有广泛的药理活性。研究川陈皮素在抗肿瘤方面的药物活性,探讨其与抗肿瘤药物联合应用对肿瘤细胞的影响。为川陈皮素在抗肿瘤领域的研究提供科学依据并发掘其潜在的应用价值。(1)川陈皮素联合比卡鲁胺对前列腺癌细胞的影响及机理研究。以前列腺癌细胞VCaP和PC-3为体外细胞模型研究川陈皮素和比卡鲁胺的抗前列腺癌作用。细胞的存活采用MTT法和台盼蓝拒染实验。中效原理计算药物的协同效果。选择30μM川陈皮素+30μM比卡鲁胺的药物组合,分析两药对细胞凋亡、克隆形成和迁移的影响,分别采用PI染色、克隆形成实验和划痕实验。荧光素酶报告独立基因法检测细胞中NF-κB的活性,蛋白表达采用western blot。(2)川陈皮素联合吉西他滨对胰腺癌细胞的影响及机理研究。以胰腺癌细胞PANC-1为体外细胞模型研究川陈皮素和吉西他滨的抗胰腺癌作用。细胞的存活、增殖、迁移和侵袭影响分别采用MTT法、肿瘤微球形成实验、划痕实验和Tranwell小室实验。中效原理计算吉西他滨与不同浓度的川陈皮素联合应用的协同效果。蛋白表达采用western blot实验。(1)川陈皮素联合比卡鲁胺通过下调NF-κB、Erk1/2和STAT3活性协同抑制前列腺癌细胞。实验结果表明,川陈皮素和比卡鲁胺有效抑制VCaP和PC-3细胞存活,且具有协同抑制前列腺癌细胞存活能力,联合组浓度20-50μM作用72 h存活率分别为86.7%-29.8%和63.3%-20.4%,协同指数CI<1。与单药组相比,川陈皮素联合比卡鲁胺协同抑制VCaP和PC-3细胞的克隆形成、迁移(抑制率分别约为53.7%和58.6%)以及诱导凋亡(诱率分别约为36.0%和34.2%)。荧光素酶报告独立基因结果显示,川陈皮素联合比卡鲁胺显著抑制VCaP和PC-3细胞中NF-κB的活性,抑制率分别为39.0%和47.3%。Western blot结果显示,两药联合显著抑制细胞中p-p65、p-STAT3、p-Erk1/2、survivin、c-myc的表达。(2)川陈皮素抑制PANC-1细胞增殖、迁移和侵袭并增强吉西他滨的抗肿瘤活性。实验结果表明,川陈皮素显著抑制PANC-1细胞的增殖,20-120μM作用72 h细胞存活率为81.6%-47.2%;40和80μM的川陈皮素通过抑制PANC-1细胞中MMP-2表达从而抑制细胞的迁移(划痕迁移率分别为54.4%和32.6%,Transwell迁移率分别67.7%和35.6%)和侵袭(侵袭率分别为74.1%和40.8%);川陈皮素显著抑制PANC-1细胞中p-STAT3/STAT3和p-mTOR/mTOR的表达。吉西他滨联合川陈皮素的结果显示,两药联合协同抑制PANC-1细胞增殖(CI<1),细胞存活率和微球形成率分别为56.8%-46.1%和57.4%-15.9%。Western blot分析显示两药联合显著抑制PANC-1细胞中p-STAT3/STAT3的表达。本研究发现川陈皮素能够增强比卡鲁胺和吉西他滨的抗肿瘤效果,是一种有前景的抗癌药物辅助治疗的候选药物。