【摘 要】
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烟草腺毛与烟株抗性和烟叶品质密切相关。NtCycB2对烟草腺毛发生具有负调控作用,该基因敲除可提高分泌型腺毛的密度。为了创制多腺毛烟草材料,选育定向改良新品种,本研究对K326的两个NtCycB2敲除株系wu-2和wu-16的T1代进行了检测和筛选,获得了纯合的去载体的突变株;在此基础上,对两个株系进行了农艺性状、腺毛形态、叶面化学成分、烤后烟常规化学成分、中性香气成分比较分析为该基因在烟草分子育
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烟草腺毛与烟株抗性和烟叶品质密切相关。NtCycB2对烟草腺毛发生具有负调控作用,该基因敲除可提高分泌型腺毛的密度。为了创制多腺毛烟草材料,选育定向改良新品种,本研究对K326的两个NtCycB2敲除株系wu-2和wu-16的T1代进行了检测和筛选,获得了纯合的去载体的突变株;在此基础上,对两个株系进行了农艺性状、腺毛形态、叶面化学成分、烤后烟常规化学成分、中性香气成分比较分析为该基因在烟草分子育种种的应用奠定了基础。主要研究结果如下:1.对NtCycB2基因敲除阳性株系Wu-2和Wu-16T1代进行了检测分析,发现Wu-2中NtCycB2基因发生了两种突变:分别缺失了 4 bp（同时还发生了 1个C/T碱基突变）和7 bp,而Wu-16的NtCycB2基因只发生了 A/T碱基对的插入一种突变。并通过潮霉素的PCR检测,获得了无转基因元件的纯合敲除植株。2.2.对Wu-2、Wu-16进行了农艺性状分析,发现Wu-2和Wu-16在株高上显著高于对照K326,节距、茎围、最大叶长、最大叶宽和叶片数上也略高于对照K326。总体来看,Wu-2和Wu-16生长势略强于对照K326。3.利用超景深显微技术对Wu-2和Wu-16的上、中、下三个部位的叶片腺毛形态进行观察和分析,结果发现:K326、Wu-2和Wu-16叶表面腺毛均由长柄分泌型、短柄分泌型和非分泌型三种类型构成,其中Wu-2中分枝腺毛比例较高;三种材料均表现出上部叶腺毛密度大于中部叶大于下部叶的规律,任意部位Wu-16、Wu-2的腺毛密度均显著高于K326。4.采用气相色谱-质谱（GC-MS）联用技术,对Wu-2和Wu-16株系的成熟期中部叶叶面化学成分进行了分析,结果发现:K326、Wu-2和Wu-16叶面化学成分组成一致,以西柏烷类二萜、糖酯类和烷烃类为主;Wu-2和Wu-16叶面分泌物总量显著高于对照K326,其中,以西柏烷类和烷烃类表现较为突出,而蔗糖酯的含量稍有减少。5.烤后烟常规化学成分分析表明,还原糖及总糖类、总氮类及烟碱在Wu-2和Wu-16中的含量均高于对照K326;而钾和氯在Wu-2和Wu-16中的含量均低于对照K326。中性香气物质成分分析表明,苯丙氨酸类、棕色化产物类、类西柏烷类、新植二烯和其它香气成分在Wu-2和Wu-16中的含量均高于对照K326。
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