趋化因子CCL20在肝细胞性肝癌中的表达及对预后的价值研究

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目的:肝细胞性肝癌是我国常见恶性肿瘤之一,目前仍缺乏有效的治疗手段,临床治疗主要以手术切除为主,但是术后易复发转移成为改善患者预后的主要障碍。因此寻求有价值的肝细胞性肝癌转移与复发的检测指标,可以指导临床上对高复发肝细胞性肝癌患者进行早期干预。CCL20能够诱导肝癌细胞增殖,抑制细胞凋亡,增加细胞的存活,但是CCL20在肝细胞性肝癌患者预后中的价值尚不清楚。本研究旨在探究CCL20在肝细胞性肝癌中的表达特点及其作为预后评估的观察指标的价值,以便对高复发风险人群进行早期干预提供理论依据。方法:收集2015年]0月-2016年2月于苏州大学附属第二医院、泗洪县人民医院病理确诊的肝细胞性肝癌患者的肿瘤组织标本和血液样本。应用RT-PCR法检测肝细胞性肝癌组织和癌旁组织中CCL20表达水平,通过ELISA检测患者术前和术后第3、7、14天以及复发转移时血清中CCL20表达水平。收集患者的临床资料,用Mann-Whitney U检验研究CCL20表达与临床病理特征之间的关系。进一步应用蛋白印迹法检测有无复发转移两组间CCL20及CCL20调节蛋白MAPK的表达水平。收集患者随访结果,采用Kaplan-Meier方法计算患者的总生存率和无病生存率。使用SPSS 20.0软件对实验结果进行统计学分析。每个实验至少独立重复3次,确保实验重复性好。数据的组间比较采用方差分析。p<0.05表示差异具有统计学意义。结果:与术前CCL20水平相比,HCC患者在术后第3天检测血清CCL20水平下降(103.98pg/ml vs 91.10 pg/ml,p<0.05),术后第 7 天 CCL20 下降显著,而后至术后第14天降低幅度变慢。术后发生肝内转移患者血清CCL20水平较该患者术后2周时明显上升(104.43pg/ml vs 63.88pg/ml,p<0.05),在术后肺转移组并没有观察到这一现象(65.42pg/ml vs 61.34pg/ml,p>0.05)。CCL20在肝细胞性肝癌组织中表达水平明显高于癌旁组织(p<0.01)。癌组织内CCL20表达水平与原发肿瘤大小、临床分期、淋巴结受累情况明显相关(p<0.05),与患者年龄、性别、可能的致病原因、肝功能、是否合并肝硬化、肿瘤数目、脉管有无癌栓以及术后肺转移无关(p>0.05)。根据术后随访结果,原发灶中CCL20表达水平与术后发生肝内转移明显相关(p<0.05),与是否发生肺转移不相关。以最佳诊断界值将患者分为预后好和预后差两组,CCL20在预后好患者组的表达明显低于预后差组。单因素分析表明,癌组织内低表达CCL20的患者,总体的无病生存率(16.7m vs 8.5m,p=0.003)和总生存率(24.5m vs 13.0m,p=0.0003)均明显优于CCL20高表达组。进一步在蛋白水平验证,CCL20及MAPK在HCC癌组织中的表达越高,预后越差。结论:HCC患者的血清CCL20表达在术后即显著下降。随访发生肝内转移的患者血清CCL20上升超过术后2周水平,表明血清CCL20表达与肝癌细胞增殖和肿瘤进展相关。CCL20在肝细胞性肝癌组织中表达增强,与肿瘤的病理学特征相关,通过随访还发现其可能参与了肝癌细胞的增殖和转移,特别是肝内转移。癌组织内高表达的CCL20可能与术后的无病生存率和总生存率密切相关,CCL20可以为肝细胞性肝癌的术后随访及预后评估提供新的观察指标。
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