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目的:代谢综合征已成为世界范围内的健康问题。以高血糖、肥胖、高血压和胰岛素抵抗为特征的代谢综合征及其合并症,对人群健康构成严重威胁。胰岛素抵抗及其相关的代谢综合征,与育龄期女性的生殖问题密切相关。子宫内膜蜕膜化对维持胚胎的正常发育具有重要作用。子宫内膜蜕膜化的异常可导致胚胎无法正常获取营养,从而致胚胎不能正常发育。课题组在前期研究中已经证实高水平胰岛素对早孕小鼠子宫内膜蜕膜化有影响,但其机制尚不明确。卵巢分泌的雌激素和孕酮对子宫内膜蜕膜化至关重要。有研究已经证实胰岛素可通过一系列信号通路调节细胞凋亡,且卵巢细胞的凋亡平衡是蜕膜化正常进行的重要保证。因此,本文旨在研究高水平胰岛素对妊娠早期卵巢细胞凋亡的影响,并进一步探讨其可能的机制。方法:1.动物模型的建立及标本收集:购买8周龄昆明鼠饲养,分别建立正常组和高胰岛素小鼠模型。将正常(或结扎输精管)雄鼠与雌鼠进行交配,次日见阴栓标记为D1(或PD1),分别收集正常组与高胰岛素组D7、D8(或PD7、PD8)的血清和卵巢组织。2.高胰岛素对早孕小鼠卵巢凋亡的影响:(1)TUNEL方法检测早孕小鼠D8卵巢细胞的调亡;(2)免疫组化检测孕D8小鼠卵巢Bax和Bcl2的表达;(3)westernblot检测正常妊娠(d7,d8)以及假孕(pd7,pd8)小鼠卵巢凋亡相关蛋白的表达。3.高浓度胰岛素对早孕小鼠卵巢pi3k/akt信号通路相关蛋白的影响:(1)westernblot检测正常妊娠(d7,d8)以及假孕(pd7,pd8)小鼠卵巢pi3k/akt信号通路相关蛋白的表达;(2)宫角注射pi3k/akt信号通路特异抑制剂ly294002,进一步分析pi3k/akt信号通路是否参与高浓度胰岛素对早孕小鼠卵巢细胞凋亡的影响。结果:1.高浓度胰岛素对早孕小鼠激素分泌的影响:elisa结果显示高胰岛素组小鼠d7和d8天血清中胰岛素浓度显著升高,而e2、p4浓度均显著降低。2.高浓度胰岛素对早孕小鼠卵巢凋亡的影响:tunel结果显示高胰岛素组早孕小鼠卵巢细胞凋亡显著降低;免疫组化结果显示高胰岛素组早孕小鼠卵巢组织bax表达显著下降而bcl2表达显著升高;westernblot结果显示高胰岛素组早孕小鼠卵巢组织bax、cleaved-casepase3、cleaved-parp表达明显降低而bcl2表达明显升高。3.pi3k/akt信号通路参与高胰岛素抑制的早孕小鼠卵巢细胞凋亡:westernblot结果显示akt磷酸化在高胰岛素组早孕小鼠卵巢组织中被激活。抑制剂ly294002能够改善高水平胰岛素引起的卵巢凋亡以及pi3k/akt信号通路相关蛋白的表达。结论:高胰岛素可能抑制早孕小鼠卵巢组织的凋亡,pi3k/akt信号通路可能参与这一过程,但其具体机制还有待进一步研究。