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目的本文旨在通过检测PCNA、血管生成、信号通路等相关蛋白表达来分析南方红豆杉水提物抑制人肺癌A549细胞机制,同时通过检测EGFR表达分析其联合厄洛替尼对人肺癌A549细胞的影响,为南方红豆杉水提物抗肺癌的临床治疗提供实验依据。方法①通过ELISA方法、Western-blot方法检测南方红豆杉水提物作用A549细胞24h后对PCNA、VEGF、MAPK信号通路等蛋白水平的影响。以2.0mg/ml、2.5mg/ml、3.0mg/ml三个不同浓度南方红豆杉水提物作用于人肺癌A549细胞24h后,检测PCNA、VEGF、ERK、P-ERK、P38、P-P38蛋白的表达情况,并与空白对照组比较。②通过MTT法筛选厄洛替尼抑制A549细胞的最佳浓度。③通过MTT法检测南方红豆杉水提物联合厄洛替尼对人肺癌A549细胞增殖的影响并通过ELISA方法、Western-blot方法检测对EGFR,磷酸化EGFR蛋白表达的影响。南方红豆杉水提物组(Ⅰ组)按浓度分为Ia组(2.0mg/ml)、Ib组(2.5mg/ml)、Ic组(3.0mg/ml)；厄洛替尼组(Ⅱ组)浓度为20uM；厄洛替尼与南方红豆杉水提物联合组(Ⅲ组),其中,厄洛替尼浓度为20uM,南方红豆杉水提物浓度为2.5mg/ml；Ⅰ-Ⅲ组分别干预A549细胞24h后与空白对照组(Ⅳ组)结果进行比较。结果①南方红豆杉水提物能够下调人肺癌A549细胞PCNA蛋白表达；南方红豆杉水提物能够上调P-P38蛋白表达,下调P-ERK蛋白表达,影响A549细胞MAPK信号通路；VEGF蛋白无影响。②厄洛替尼浓度为20uM时其对人肺癌A549细胞抑制率最高,达27.87%；联合组抑制率分别为54.33%、61.96%、71.84%与厄洛替尼组(27.8%)和空白对照组比较,均具有显著差异,P<0.01；③南方红豆杉水提物能够下调人肺癌A549细胞P-EGFR蛋白表达,联合厄洛替尼后P-EGFR蛋白表达下降明显。结论①南方红豆杉水提物抑制人肺癌A549细胞增殖的作用可能与下调PCNA,上调P-P38蛋白表达,下调P-ERK蛋白,阻断ERK1/2信号通路可能是该中药抗肿瘤作用机理之一。②厄洛替尼具有抑制人肺癌A549细胞增殖的作用,并呈一定的量效关系；③南方红豆杉水提物联合厄洛替尼能够增强抑制人肺癌A549细胞增殖的作用,其机制可能与下调了P-EGFR蛋白有关。