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乳腺癌是发生在乳腺上皮组织的恶性肿瘤,严重威胁全球女性身心健康甚至危及生命,发病率在美国女性恶性肿瘤中居于首位。近年来我国乳腺癌发病率的增长速度高出高发国家12个百分点,特别是其发病有年轻化的趋势,乳腺癌已经成为现代社会重大公共卫生问题。肿瘤耐药是导致乳腺癌化疗失败的主要原因,也是影响乳腺癌患者预后的重要因素,因此能够克服或逆转乳腺癌肿瘤化疗耐药的新方法的研究,成为当前治疗耐药乳腺癌的关键探索方向。本课题采用现代纳米技术基于磁性介孔二氧化硅纳米材料构建出肿瘤双重靶向和pH响应释药的多药共载复合纳米载体,实现肿瘤靶向的化疗/光动力联合治疗与自噬抑制剂联合应用,并且能够实现肿瘤靶向传递及控制释药,有效提高肿瘤组织药物浓度,降低全身毒副作用。本课题的研究内容主要包括以下三部分:在第一章研究中,首先采用改进St?ber方法合成了具有双孔道核壳结构的介孔二氧化硅纳米粒,MSN粒径大小约为100 nm,形貌规整呈球形,且分散性较好,总孔容为2.47 cm3/g,孔径为5.36 nm,较大的比表面积和孔容,使MSN能够有效负载大量的药物。其次在氨基化MSN表面通过亲核取代修饰嵌合超顺磁性氧化铁纳米粒,构建了磁性介孔二氧化硅纳米粒。然后以DCC为缩合剂酰胺化共价结合光敏剂Ce6,同时负载BCRP抑制剂Ko143,并交联高分子聚合物FA-PEG-b-PAsp,最后负载抗肿瘤药物DOX,完成了共载药纳米复合物Ce6@MMSN/DOX/Ko143@PAsp-b-PEG-FA的构建。共载药纳米复合物DOX的载药量为21.76%,pH相应性释药研究表明其具有pH敏感控制释放性能,在弱酸性条件下60 h时,DOX累积释放率高达80.53%,pH响应性释药能够有效降低DOX在正常组织的释放,同时在肿瘤组织定向释药、增加肿瘤组织中药物浓度,能够更高效地发挥抗肿瘤作用;通过磁滞回线测试仪检测构建的共载药纳米复合物的磁饱和强度为5.3 emu/g,结果显示其具有良好的超顺磁性,可以达到良好的磁靶向效果。在第二章研究中,从细胞水平评价了共载药纳米复合物对乳腺癌MCF-7/ADR细胞的增殖抑制及逆转作用。荧光显微镜、生物透射电镜及流式细胞仪结果显示共载药纳米复合物具有良好的磁靶向性、叶酸靶向性及细胞摄取能力;根据CCK-8及流式细胞仪的检测结果可知共载药纳米复合物对MCF-7/ADR细胞的抑制作用存在着浓度依赖性,化疗/光动力联合治疗具有一定的协同作用,其IC50值为4.23μg/ml,而游离DOX IC50值高达363.2μg/ml,共载药纳米复合物可以显著逆转MCF-7/ADR细胞耐药,有效诱导MCF-7/ADR细胞凋亡或死亡;Transwell实验结果表明共载药纳米复合物可以有效抑制MCF-7/ADR细胞的转移及迁移。在第三章研究中,利用体内实验通过观察肿瘤体积、肿瘤重量、裸鼠体重、生存周期评价共载药纳米复合物对阿霉素耐药乳腺癌的治疗作用。采用在BABL/c裸鼠第四乳腺脂肪垫上注射MCF-7/ADR细胞的方法建立了耐药乳腺癌移植瘤模型;普鲁士蓝染色实验结果表明共载药纳米复合物具有良好的体内磁靶向性;裸鼠血液生化参数及HE染色检测结果显示共载药纳米复合物的体内毒性小;裸鼠肿瘤体积和肿瘤重量表明共载药纳米复合物具有显著的抑制肿瘤生长作用,生存曲线结果显示共载药纳米复合物能够延长裸鼠生存时间,施加磁场共载药纳米复合物组肿瘤体积和重量最小,生存期相对最长,并具有统计学差异。动物实验结果表明共载药纳米复合物具有良好的体内耐阿霉素乳腺癌治疗效果且毒副作用小。综上所述,本研究成功构建了具有肿瘤双重靶向及pH响应性释药共载药纳米复合物,该复合物具有良好的超顺磁性,能够有效的被MCF-7/ADR细胞摄取,具有较好的叶酸靶向性、磁靶向性及pH响应性释药性能,在细胞水平及动物水平均表现出良好的抑制耐药乳腺癌生长的效果,具有克服肿瘤细胞的化疗耐药、降低毒副作用的能力。本研究有望为肿瘤靶向联合递药体系设计提供新思路,为耐药乳腺癌的治疗开辟新途径,具有重要的科学和研究意义。