具有跨膜和复合靶向功能的超微磁性载药系统的构建

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本文以聚合物基共沉淀法制备了粒径小于100nm、表面包覆聚合物材料(可溶性淀粉和O-羧甲基壳聚糖)的超微磁性载体粒子(MNPs ),并考察了制备的超微磁性载体粒子的载药性能。通过碳二亚胺法将所制备的两种超微磁性载体粒子与抗癌药物甲氨喋呤(MTX)偶联,制得了MTX-超微磁性载药粒子。UV法检测,两种MTX-超微磁性载药粒子的载药率分别为:45.6%,41.088%;红外光谱(IR)检测证实:MTX以共价键方式连接在超微磁性载体粒子表面。采用电子透射显微镜(TEM)、原子力显微镜(AFM)、激光粒度分析仪(PSA)和VSM法(Vibrating Samples Magnetometer, LDJ9600-1)对超微磁性载体粒子的粒径、粒径分布、以及磁性能等进行了表征,结果表明:MTX-超微磁性载体粒子呈核壳结构且表面平滑,粒径为70-80nm,粒度分布均匀且具有超顺磁特性。在此基础上,本文将具有独特跨膜功能的多肽TAT与MTX-超微磁性载药粒子连接,制备了具有跨膜功能的MTX-TAT-超微磁性载药粒子;将具有靶向肿瘤细胞的转铁蛋白TF与MTX-超微磁性载药粒子连接,制备出具有复合靶向功能的MTX-TF-超微磁性载药粒子;并最终将TAT与TF同时与MTX-超微磁性载药粒子连接,构建出具有跨膜和复合靶向功能的MTX-TAT-TF-超微磁性载药系统;该多功能载体系统国内外尚无相关报道。通过透射电子显微镜(TEM)及激光粒度检测仪(PSA)测定,上述所有超微磁性载药粒子呈核壳结构且表面平滑、粒径均在85-95nm、粒度分布均匀。高效液相色谱(HPLC-UV)测试结果表明:各载药粒子与TAT,TF的连接效率均为100%,从而证明本实验方法制备的超微磁性载体粒子具有很好的承载效能。本文最后用MTT法对MTX-超微磁性载药粒子、MTX-TAT-超微磁性载药粒子、MTX-TF-超微磁性载药粒子和MTX-TAT-TF-超微磁性载药系统进行了体外肿瘤细胞抑制试验。以MTX的肿瘤细胞抑制率为对照,分别研究了了上述超微磁性载药粒子在正常环境和磁场环境下对C6肿瘤细胞的抑制率。实验证明:上述不同的超微磁性载药粒子均保持了MTX的抗肿瘤特性(﹥80%);而且证实外加磁场可以使超微磁性载药粒子更有效地杀伤肿瘤细胞,从而提高肿瘤细胞抑制率。另外,分别连接有转铁蛋白TF和跨膜肽TAT的超微磁性载药粒子的肿瘤细胞抑制率明显高于MTX-超微磁性载药粒子的肿瘤细胞抑制率。值得关注的是:同时载有TF和TAT的MTX-TAT-TF-超微磁性载药系统的肿瘤细胞抑制率最高,在某些时段甚至高于MTX纯药物的肿瘤细胞抑制率,证明了外加磁场、TAT、TF能有效的提高超微磁性载药粒子的抗肿瘤功效。
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