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由于高效毛细管电泳实用、高效、灵敏、快速以及低损耗,因此被广泛用于分析化学、生物科学、生物技术、药学分析和生物医学等各个方面,尤其是在中草药活性成分的研究领域引起了人们高度重视和极大兴趣。
本文归纳总结了毛细管区带电泳的分离原理,并系统综述了近5年来毛细管区带电泳(CZE)在药物分析上的研究进展。在此基础上运用毛细管区带电泳这一最常用、最简单的分离模式,对生物碱类、黄酮类、蒽醌类和酚酸类中药活性成分进行了分离分析研究,完成工作如下:
1、以15mmol/L Na<,2>B<,4>O<,7>-20%(v/v)乙腈-30mmol/L β-环糊精-1.0%(v/v)乙二醇的缓冲液(pH9.16)为运行缓冲,建立一个在15min内同时分离和测定了大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、儿茶素和白藜芦醇五种活性成分的新CZE方法;优化了分离条件,考察了线性范围,并将该方法用于了16个来源不同的虎杖样品的分析,测定了样品中这五个组分的含量,样品测定的RSD值为0.36-3.19%,加样回收率为94.7-106.9%,可见方法具有较好的重现性和一定的实用价值。
2、以50mmol/L 的NaH<,2>PO<,4>+20%乙晴(pH8.06)为电泳缓冲溶液,建立了一个同时快速分离小檗碱、巴马汀和药根碱的CZE方法。与文献报道的类似方法相比,该方法具有灵敏度更高,线性范围更广的优势。将此方法用于中国传统中药黄藤中的小檗碱、巴马汀和药根碱三个生物碱活性成分的分离测定,结果满意,且巴马汀和药根碱的测定结果符合文献报道,方法有一定的实用价值。
3、利用CZE,首次建立了一个同时分离分析丹参及其制剂中的水溶和脂溶性活性成分(原儿茶酸、隐丹参酮和丹参酮Ⅱ<,A>)的方法。优化得到的电泳条件为:含25mmol/L,Na<,2>B<,4>O<,7>-20%甲醇(v/v)-30mmol/L β-环糊精的缓冲液(pH9.16),分离电压17kV,柱温30℃,PDA检测器(检测波长为254nm);采用压力(0.5psi,3447.38 Pa)进样5.0s。将该方法应用于丹参药材及其制剂中这三种活性成分的分离测定,结果令人满意。
4、以茶叶及茶饮料中具有生物活性并对茶叶的品质有一定影响的嘌呤碱成分即咖啡因、可可碱、茶碱、黄嘌呤、次黄嘌呤为对象,首次建立了一个同时分离测定这五种嘌呤生物碱的CZE方法。在优化了分离测定条件后,确定20mmol/L硼砂溶液(pH9.69)为运行电解质,色氨酸为内标。结果表明,该方法可以在15min内实现茶叶及茶饮料中这五种组分的同时分离测定,具有快速、简单、灵敏和精密度好的特点,有一定的应用前景。此外,本文还用CZE法测得了这五个组分和色氨酸的pK<,a>值,结果与文献报道值基本一致,具有参考价值。